利用桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)制備HBV核心顆粒.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：利用桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)（Baculovirus expression vector system，BEVS)制備HBV核心顆粒，以用于新型抗病毒藥物體外抗病毒活性的實(shí)驗(yàn)研究。 方法：構(gòu)建含有乙型肝炎病毒聚合酶基因(HBV P基因)和核心蛋白基因(HBV C基因)的重組質(zhì)粒pFastbac Dual-P-C,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH10Bac進(jìn)行轉(zhuǎn)座,提取重組Bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞，獲得含有HBV P基因和C基因的重組桿

2、狀病毒。用重組桿狀病毒感染昆蟲Sf9細(xì)胞進(jìn)行蛋白表達(dá),然后通過免疫共沉淀純化目的蛋白，行SDS-PAGE電泳與銀染及RT-PCR檢測(cè)各成分。 結(jié)果：成功構(gòu)建了含HBV P基因和C基因的重組桿狀病毒，且能在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)目的蛋白并進(jìn)行純化，純化產(chǎn)物中含HBV聚合酶、核心蛋白和RNA。 結(jié)論：利用桿狀病毒－昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),能成功地構(gòu)建出含HBV P基因和C基因的重組桿狀病毒，在昆蟲細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，并純化出HBV核心顆粒，為

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