食管癌核基質(zhì)與p16基因上游序列的相關(guān)性研究.pdf

1、核基質(zhì)是由Berezney和Cofey于1974年首次提出的，它是核酸的骨架結(jié)構(gòu)。是經(jīng)核酸酶消化及高鹽抽提等處理依次去除細(xì)胞核脂質(zhì)，可溶性組蛋白以及染色質(zhì)后的獨立的殘余亞核結(jié)構(gòu)，它作為細(xì)胞核的支架結(jié)構(gòu)，在DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)及RNA合成、剪切、運輸?shù)确矫嫫鹬匾饔?。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，組織細(xì)胞不同，核基質(zhì)蛋白成分有一定的差別，與正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞中亦有特異性核基質(zhì)蛋白成分存在。核基質(zhì)蛋白具有明顯的組織和細(xì)胞特異性。在研究腫瘤發(fā)病

2、機制及尋找腫瘤標(biāo)記物方面，腫瘤相關(guān)的核基質(zhì)的分離和確定已成為一種新的方法和途徑。迄今，已在肝癌，結(jié)腸癌，前列腺癌及乳腺癌等組織中分離確定了特異性的核基質(zhì)。一些已應(yīng)用于臨床的診斷和治療(例如:NMP22,NMP66)。食管癌的早期診斷的新型腫瘤標(biāo)志物尚未發(fā)現(xiàn)。p16基因低表達(dá)見于包括食管癌在內(nèi)的多種腫瘤組織中。p16基因只有與核基質(zhì)結(jié)合，才能轉(zhuǎn)錄mRNA,進(jìn)而表達(dá)p16蛋白起作用，而食管癌核基質(zhì)與p16基因，尤其是與p16基因上游序列調(diào)控

3、區(qū)作用的相關(guān)性分析目前尚未報道。 目的：研究p16基因上游序列與食管癌組織核基質(zhì)蛋白特異結(jié)合的相關(guān)性。旨在探討食管癌發(fā)病的機制。方法：應(yīng)用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，目的DNA片段回收，DNA探針的制備，SDS-PAGE技術(shù)和Southwestern雜交技術(shù)，對24例食管癌組織、癌旁組織(癌旁組織距癌灶>3．0cm)及正常組織的核基質(zhì)蛋白進(jìn)行研究。用UVPtool軟件進(jìn)行定量分析。結(jié)果：SDS-PAGE顯示：與正常組織比較，食管癌組織28kD的核