小檗堿與梓醇及其配伍對胰島素抵抗3T3-L1脂肪細胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表達的影響.pdf

1、目的：通過觀察比較小檗堿、梓醇及其配伍對胰島素抵抗（Insulin Resistance，IR）3T3-L1脂肪細胞葡萄糖消耗及腫瘤壞死因子α(TNF-α)，白細胞介素1β(IL-1β)與白細胞介素6(IL-6)分泌及mRNA表達的影響，進而從炎性因子途徑探討小檗堿、梓醇與其配伍改善IR的作用機制和黃連丸方劑配伍的科學內(nèi)涵。
　　 方法：
　　 第一部分小檗堿與梓醇及其配伍對IR 3T3-L1脂肪細胞葡萄糖消耗的影響采用

2、地塞米松誘導IR 3T3-L1細胞模型，將IR 3T3-L1細胞分為模型組及藥物干預組（分別給予小檗堿、梓醇、小檗堿+梓醇進行干預），另設正常脂肪細胞作為對照組，用葡萄糖氧化酶法檢測培養(yǎng)液中葡萄糖消耗量。第二部分小檗堿與梓醇及其配伍對IR3T3-L1脂肪細胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表達的影響：收集細胞和培養(yǎng)液上清，采用酶標記免疫吸附測定法（ELISA）檢測培養(yǎng)液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平，以實時定

3、量PCR 檢測細胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA的表達。
　　 結(jié)果：
　　 第一部分小檗堿與梓醇及其配伍對IR 3T3-L1脂肪細胞葡萄糖消耗的影響IR模型組葡萄糖的消耗量較正常對照組顯著減少（P<0.01）；與模型組相比，小檗堿組、梓醇組、小檗堿+梓醇組的葡萄糖消耗量顯著增加（P<0.01），小檗堿組和梓醇組之間葡萄糖消耗量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），梓醇+小檗堿組葡萄糖消耗量高于單藥組，差異具有顯

4、著性意義（P<0.01）。
　　 第二部分小檗堿與梓醇及其配伍對IR 3T3-L1脂肪細胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表達的影響與對照組相比，模型組TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA的表達顯著升高（P<0.01）；與模型組相比，小檗堿組、梓醇組、小檗堿+梓醇組的TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA的表達顯著下降（P<0.01），梓醇+小檗堿組TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA的

5、表達低于單藥組，差異具有顯著性意義（P<0.01）；小檗堿組與梓醇組間IL-6分泌及mRNA的表達差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）,小檗堿組TNF-α、IL-1β分泌及mRNA的表達低于梓醇組，具有顯著性差異（P<0.01）。
　　 結(jié)論：
　　 1.小檗堿、梓醇及其配伍均能增加IR 3T3-L1脂肪細胞的葡萄糖消耗，其中，小檗堿+梓醇組效應優(yōu)于單藥組，初步說明了黃連丸配伍的科學性。
　　 2.小檗堿和梓醇及其配

6、伍均能降低IR 3T3-L1脂肪細胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表達水平，梓醇對于TNF-α、IL-1β表達和分泌影響作用不如小檗堿明顯，小檗堿和梓醇各自對IR3T3-L1脂肪細胞IL-6表達和分泌的影響沒顯著差異。小檗堿與梓醇配伍后，IR3T3-L1脂肪細胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表達比單藥組有顯著下降，提示配伍組對細胞炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表達的影響具有協(xié)同作用