BRL37344對3T3-L1細胞脂肪分解及瘦素、TNF-α表達的影響.pdf

1、目的：肥胖已成為嚴重影響人類健康的世界公共衛(wèi)生問題，與2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)、高血壓、冠心病、腫瘤等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但目前對于肥胖的病因、發(fā)病機制仍有待研究，且缺少直接有效的治療手段。選擇性β3-腎上腺素受體激動劑(β3-adrenergic receptor agonist，β3-ARa)能夠增加嚙齒類動物白色脂肪組織(white adipose tissue，WAT)的脂質(zhì)

2、分解與棕色脂肪組織(brown adipose tissue，BAT)的非顫栗性產(chǎn)熱，降低體脂含量，為肥胖的治療提供了新的思路。脂肪組織是能量儲存器官，也是人體最大的內(nèi)分泌組織，其分泌的許多脂肪細胞因子對體內(nèi)能量平衡、糖脂代謝有不可或缺的作用。本研究旨在通過觀察選擇性β3-ARa BRL37344對分化成熟的3T3-L1脂肪細胞脂肪分解及與脂代謝相關(guān)的脂肪細胞因子瘦素、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-αTN

3、F-α)表達分泌的影響，進一步明確β3-ARa改善脂代謝降低體重的效應，并探討其作用機制。
　　方法：在37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細胞，采用含有胰島素、地塞米松及3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(3-isobuty1-1-methylxanthine，IBMX)的分化培養(yǎng)基誘導其分化成熟，通過觀察細胞形態(tài)與油紅O染色鑒定細胞。脂肪細胞分化成熟后，采用不同濃度(0、10-9、10-7mol/L)與不同作用時間(0、12

4、、24、48h)的BRL37344干預，收集細胞及培養(yǎng)基于-80℃凍存。通過比色法測定培養(yǎng)基中的甘油含量作為評價脂肪分解的指標，采用RT-PCR法檢測細胞內(nèi)瘦素、TNF-αmRNA的表達，ELISA法測定培養(yǎng)基內(nèi)瘦素、TNF-α的蛋白含量。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(-x±s)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗和方差分析，P<0.05顯示差別具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度(10-9、10-7mol/L)

5、與作用時間(12、24、48h)的BRL37344均顯著增加3T3-L1脂肪細胞培養(yǎng)基內(nèi)的甘油含量，增高水平呈劑量與時間依賴性。最大刺激作用為10-7mol/L BRL37344干預48h，甘油含量較對照組增加了95～102％(P<0.01)。
　　2.不同濃度(10-9、10-7mol/L)的BRL37344均抑制3T3-L1脂肪細胞瘦素、TNF-α的表達與分泌，差異均有統(tǒng)計學意義，隨著濃度的增加，瘦素、TNF-α的表達、分泌量

6、降低的更為顯著，10-7mol/L BRL37344干預48h時達最低水平，瘦素、TNF-αmRNA的表達量分別降低了97％(P<0.01)、130％(P<0.01)，分泌量則分別下調(diào)了48％(P<0.01)、95％(P<0.01)。
　　3.10-7mol/L的BRL37344干預3T3-L1脂肪細胞12h后，瘦素、TNF-α的表達、分泌量與干預前相比無明顯變化(P>0.05)，干預24h后可表現(xiàn)出顯著的抑制作用，48h后達到最

7、低水平，瘦素、TNF-αmRNA的表達量分別降低了119％(P<0.01)、158％(P<0.01)，分泌量則分別下調(diào)了50％(P<0.01)、92％(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.BRL37344能夠顯著增加脂肪細胞的脂質(zhì)分解，減少細胞內(nèi)的脂質(zhì)含量。
　　2.BRL37344能夠增加脂肪細胞對瘦素、TNF-α的敏感性，改善其抵抗引起的代謝紊亂，促進其減重作用的發(fā)揮。BRL37344與脂肪細胞內(nèi)分泌功能之間的相