選擇性COX-2抑制劑逆轉(zhuǎn)肺癌順鉑耐藥作用及機制研究.pdf

1、目的：
　　探討選擇性環(huán)氧化酶-2（COX-2）抑制劑逆轉(zhuǎn)肺癌對順鉑耐藥的作用，并從分子水平研究其機制。
　　方法：
　　1.首先構(gòu)建肺癌A549/DDP細胞裸鼠移植瘤模型。
　　2.藥物干預(yù)：將荷瘤裸鼠隨機分為4組：對照組（腹腔注射生理鹽水和胃內(nèi)灌注0.5％羥甲基纖維素鈉）；尼美舒利(NIM)組（胃內(nèi)灌注尼美舒利溶液）；順鉑(DDP)組（腹腔注射順鉑溶液）；NIM與DDP聯(lián)合組（腹腔注射順鉑溶液和胃內(nèi)灌注尼美舒

2、利溶液）。NIM連續(xù)灌胃21天，DDP每4天腹腔注射1次，共5次。給藥期間，觀察裸鼠的一般狀況、測量瘤徑及鼠重，繪制腫瘤生長曲線。
　　3.計算抑瘤率：給藥3周后處死裸鼠，剝離移植瘤，檢測各組移植瘤重量、體積，計算抑瘤率。
　　4.用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定各組肺癌A549/DDP裸鼠移植瘤細胞內(nèi)的DDP濃度，以明確NIM逆轉(zhuǎn)肺癌順鉑耐藥的作用。
　　5.免疫組化法檢測各組肺癌A549/DDP裸鼠移植瘤細胞內(nèi)耐藥相關(guān)因

3、子P-gp、LRP、MRP1的蛋白表達水平，探討NIM逆轉(zhuǎn)肺癌順鉑耐藥作用的機制。
　　結(jié)果：
　　1.成功構(gòu)建肺癌A549/DDP細胞裸鼠移植瘤模型。
　　2.NIM有抑制肺癌生長的作用，瘤體體積及瘤重抑瘤率分別為22.63%和15.98%。NIM與DDP聯(lián)合用藥后抑瘤作用更明顯，瘤體體積及瘤重抑瘤率分別為60.83%和46.76%，分別明顯大于NIM組、DDP組及對照組的抑瘤率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P﹤0.05），N

4、IM有增強肺癌細胞對DDP敏感性的作用。
　　3.液相色譜-質(zhì)譜檢測結(jié)果表明，NIM與DDP聯(lián)合組移植瘤肺癌A549/DDP細胞內(nèi)的DDP濃度(700.53±81.92ng/ml)，明顯大于DDP單獨干預(yù)組的順鉑濃度(334.07±84.98ng/ml)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P﹤0.05），NIM可增加肺癌A549/DDP細胞內(nèi)的DDP濃度，有逆轉(zhuǎn)肺癌DDP耐藥的作用。
　　4.免疫組化結(jié)果顯示：P-gp、LRP、MRP1耐藥

5、基因在肺癌A549/DDP裸鼠移植瘤細胞內(nèi)均呈陽性表達，P-gp于胞膜或胞質(zhì)呈棕黃色彌漫分布表達；LRP于胞質(zhì)呈棕黃色彌漫分布表達；MRP1于胞核或胞質(zhì)呈棕黃色彌漫分布表達；P-gp、LRP、MRP1在NIM組中的陽性表達分別與其在對照組中的陽性表達相比，無顯著性差異（P＞0.05）；NIM與DDP聯(lián)合組P-gp陽性表達，分別顯著低于其在NIM組、DDP組及對照組中的表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；NIM與DDP聯(lián)合組LRP陽性

6、表達，分別顯著低于其在NIM組、DDP組及對照組中的表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；NIM與DDP聯(lián)合組MRP1陽性表達，分別顯著低于其在NIM組、DDP組及對照組中的表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.選擇性COX-2抑制劑NIM有抑制肺癌生長的作用，并有增強肺癌細胞對DDP敏感性的作用；
　　2.選擇性COX-2抑制劑NIM有逆轉(zhuǎn)肺癌對DDP耐藥的作用；
　　3.選擇性COX