新生大鼠缺血缺氧性腦損傷COX-2的合成及與細(xì)胞凋亡的關(guān)系.pdf

1、本文研究目的：利用新生大鼠缺血缺氧性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage HIBD)動(dòng)物模型，觀察缺血缺氧性腦損傷后不同時(shí)間腦細(xì)胞形態(tài)變化、COX-2的合成及細(xì)胞死亡形式，探討HIBD后COX-2的合成與細(xì)胞凋亡的關(guān)系，為缺血缺氧性腦病提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 研究方法：7日齡SD大鼠54只，雌雄不限，體重12-18g，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、假手術(shù)組和實(shí)驗(yàn)組(缺血缺氧后2h、6h、12h、18h、 24h

2、、48h、72h組)共9組，每組各6只，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物采用阻斷右側(cè)頸總動(dòng)脈后置于含8％O<,2>的低氧環(huán)境中2小時(shí)，建立缺血缺氧性腦損傷動(dòng)物模型并對(duì)其行為進(jìn)行觀察。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)取各組新生大鼠腦組織，用組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL)在光鏡下觀察腦組織的病理改變，

3、通過免疫組化法測(cè)定COX-2陽性細(xì)胞數(shù)及用TUNEL法測(cè)定凋亡細(xì)胞指數(shù)。 研究結(jié)果：缺血缺氧后新生大鼠出現(xiàn)不同程度的行為異常。HE染色缺血缺氧后2-6h右側(cè)腦神經(jīng)細(xì)胞水腫及少量局灶性壞死，缺血缺氧后72h右側(cè)腦組織中可見界限清楚的壞死灶。正常腦組織內(nèi)未觀察到明顯COX-2陽性細(xì)胞及凋亡細(xì)胞。缺血缺氧后COX-2陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加，缺血缺氧后2h即可在皮質(zhì)部位觀察到陽性細(xì)胞數(shù)；缺血缺氧后6h，COX-2陽性細(xì)胞數(shù)比較明顯；缺血缺氧

4、后24h達(dá)到高峰；然后，隨缺血缺氧時(shí)間的延長(zhǎng)，COX-2陽性細(xì)胞數(shù)逐漸減少，至缺血缺氧后72h時(shí)，COX-2陽性細(xì)胞數(shù)仍比對(duì)照組高。缺血缺氧后2h皮質(zhì)部位出現(xiàn)凋亡細(xì)胞；缺血缺氧后6h凋亡細(xì)胞明顯增多，凋亡細(xì)胞出現(xiàn)高峰時(shí)間為18h，然后凋亡細(xì)胞逐漸減少，細(xì)胞形態(tài)逐漸以壞死為主，缺血缺氧后48h-72h凋亡細(xì)胞明顯減少，壞死嚴(yán)重。 研究結(jié)論：在HIBD后18h內(nèi)，隨著COX-2的合成，腦組織內(nèi)凋亡細(xì)胞逐漸增多，表明在此階段神經(jīng)細(xì)胞仍