黏蛋白基因在人鼻息肉及變應(yīng)性鼻炎中的表達(dá).pdf

1、目的: 檢測5種黏蛋白基因(MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18、MUC19)在鼻息肉(Nasal Polyps)、變應(yīng)性鼻炎(Allergic Rhinitis)、正常鼻黏膜患者的表達(dá)情況，探討?zhàn)さ鞍自诒窍⑷饧白儜?yīng)性鼻炎的表達(dá)情況及臨床意義。 方法: 采集35例鼻息肉、25例過敏性鼻炎下鼻甲及20例單純鼻中隔偏曲正常下鼻甲黏膜上皮。所得標(biāo)本分2份，1份經(jīng)4％多聚甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，連續(xù)切片后

2、應(yīng)用免疫組化Elivision染色法檢測鼻息肉和變應(yīng)性鼻炎患者鼻黏膜中的黏蛋白基因的表達(dá)；1份提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，以管家基因β-actin為內(nèi)標(biāo)基因，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(RT-PCR)和實時熒光定量PCR(FQ-RT-PCR)反應(yīng)，檢測各樣本中的黏蛋白基因(MUCs)的表達(dá)水平。 結(jié)果: 1.通過免疫組織化學(xué)染色，觀察黏蛋白MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18在鼻黏膜組織分布情況，結(jié)果顯示四種

3、黏蛋白在鼻息肉及變應(yīng)性鼻炎患者、正常黏膜組織中均有表達(dá)，染色陽性顆粒主要集中在鼻黏膜上皮細(xì)胞的胞漿。鼻息肉及變應(yīng)性鼻炎患者M(jìn)UC5AC、MUC5B的表達(dá)明顯高于正常黏膜組織(P<0.05)，而鼻息肉、變應(yīng)性鼻炎之間表達(dá)差別無意義(P>0.05)。MUC2、MUC18的表達(dá)與正常鼻黏膜組織差別無意義(P>0.05)。 2.應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(RT-PCR.)法分析鼻息肉及變應(yīng)性鼻炎患者黏蛋白基因蛋白的表達(dá)并分析其與正常黏膜

4、組織的表達(dá)的差異。MUC5AC、MUC5B在鼻息肉組和變應(yīng)性鼻炎組中的表達(dá)高于正常對照組(P＜0.05)，鼻息肉組與變應(yīng)性鼻炎組間表達(dá)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。MUC19在變應(yīng)性鼻炎組中的表達(dá)高于鼻息肉組和正常對照組(P＜0.05)，鼻息肉組和正常對照組間表達(dá)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。MUC2、MUC18在三組中的表達(dá)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 3.成功建立了實時熒光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)

5、的檢測方法，擴增效率高(＞95％)，重復(fù)性穩(wěn)定，MUC5AC、MUC5B在鼻息肉組和變應(yīng)性鼻炎組中的表達(dá)高于正常對照組(P＜0.05)，鼻息肉組與變應(yīng)性鼻炎組間表達(dá)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。MUC2、MUC18在三組中的表達(dá)差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 4.不同MUC基因在鼻息肉組、變應(yīng)性鼻炎組、正常對照組中表達(dá)均有差異(P＜0.001)。結(jié)果：在鼻息肉、變應(yīng)性鼻炎及對照組中的黏蛋白分泌成分中，總體趨勢是一致的，M

6、UC5AC表達(dá)量最高，MUC5B次之。 結(jié)論: 1.MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18、MUC19在鼻黏膜中均有表達(dá)，其中MUC5AC、MUC5B表達(dá)較高。 2.MUC2、MUC18在鼻息肉、變應(yīng)性鼻炎和正常對照組中表達(dá)無差別。 3.免疫組化、RT-PCR及熒光PCR結(jié)果顯示MUC5AC、MUC5B在鼻息肉和變應(yīng)性鼻炎組中的表達(dá)較正常對照組高，MUC5AC、MUC5B在鼻息肉和變應(yīng)性鼻炎的黏液