TACE聯(lián)合抗血管生成治療肝癌的實驗及臨床應(yīng)用研究.pdf

1、第一部分 TACE聯(lián)合抗血管生成治療兔ⅴⅹⅡ瘤實驗研究
　　 研究目的:
　　 1.對比分析兔ⅴⅹⅡ瘤TACE、TACE聯(lián)合抗血管生成藥物治療后CT灌注成像各參數(shù)的動態(tài)變化,與組織病理及免疫組化相對照,進(jìn)一步探討TACE、TACE聯(lián)合抗血管生成藥物治療兔ⅴⅹⅡ瘤的可能機(jī)制。
　　 2.觀察不同治療方案的療效,為TACE聯(lián)合抗血管生成藥物治療肝癌提供研究基礎(chǔ)。
　　 資料與方法:
　　 1.選擇60

2、只新西蘭大白兔,建立兔ⅴⅹⅡ瘤改良模型。
　　 2.肝臟CT灌注成像:使用GE16層螺旋CT機(jī)對60只兔ⅴⅹⅡ瘤于接種后2周進(jìn)行肝臟CT灌注成像,測量腫瘤周邊血流量(BF)、血容量(BV)、毛細(xì)血管表面通透面積(PS),同時觀察腫瘤生長情況,計算治療前腫瘤大小(以腫瘤最大橫徑表示)。
　　 3.治療過程:所有60只ⅴⅴⅹⅡ瘤肝癌模型兔均采用開腹插管動脈灌注的方法進(jìn)行治療。將60只ⅴⅹⅡ瘤兔隨機(jī)分成A、B、C三組,每組20

3、只,分別灌注不同藥物:A組(聯(lián)合治療組),表阿霉素5mg+超液態(tài)碘化油混合液2ml+Endostar/YH-16(恩度)注射液1mg:B組(TACE組),表阿霉素5mg+超液態(tài)碘化油混合液2ml；C組(對照組),2ml生理鹽水。
　　 4.治療后處理:介入術(shù)后7d,三組實驗兔均分別行肝臟CT灌注成像,測量BF、BV、PS以及治療后腫瘤體積。根據(jù)治療前后各組腫瘤大小,分別計算聯(lián)合治療組和TACE組的腫瘤生長率、腫瘤生長抑制率。①腫

4、瘤生長率=(治療后的體積-治療前的體積)/治療前的體積×100％；②腫瘤生長抑制率=(治療后對照組的平均體積-治療后各組的平均體積)/治療后對照組的平均體積×100％。
　　 三組動物均于MSCT 灌注掃描完成后立即處死,切取癌灶周邊非壞死區(qū)及其周圍肝組織,由病理科專職技術(shù)員作MVD、VEGF免疫組化染色。
　　 5.統(tǒng)計學(xué)分析:先進(jìn)行重復(fù)方差分析,檢驗時間、分組是否存在交互效應(yīng)、主效應(yīng),然后進(jìn)行方差分析,先比較多組間整

5、體上是否差異存在統(tǒng)計學(xué)意義,然后采用LSD-t檢驗比較每兩組之間是否差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。如果方差不齊,則行welch檢驗,兩兩比較用Tamhane檢驗。治療前后比較應(yīng)用t檢驗,所有數(shù)據(jù)采用SPSS11.5軟件包進(jìn)行分析,取p<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.影像學(xué)表現(xiàn)
　　 60只兔ⅴⅹⅡ瘤肝癌模型均成功建立。治療前MSCT平掃發(fā)現(xiàn)多數(shù)腫瘤接種部位呈單發(fā)、膨脹性生長,圓形或卵圓形,26只模型兔瘤

6、灶區(qū)域呈等密度改變,其余34只均呈稍低密度改變,與鄰近組織分界欠清。增強(qiáng)動脈期主要表現(xiàn)為瘤灶邊緣環(huán)狀強(qiáng)化,瘤體中心呈低密度灶；門靜脈期中心為更低密度,與周圍組織分界清。兔ⅴⅹⅡ腫瘤在DSA均表現(xiàn)為血供豐富的實體瘤,DSA檢查動脈期可見腫瘤外周有股動脈分出的滋養(yǎng)血管抵達(dá)腫瘤并繞行,呈“抱球狀”改變。滋養(yǎng)血管迂曲不規(guī)則,其分支深入腫瘤內(nèi)部。實質(zhì)期腫瘤組織內(nèi)網(wǎng)狀、團(tuán)片狀染色勾畫出腫瘤輪廓。
　　 2.治療前后腫瘤體積變化
　　

7、 治療前,三組的腫瘤平均體積(O.488±0.097、0.493±0.105、0.456±0.088 cm)之間差異均不存在統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.862,p=0.428)。治療后,三組之間存在統(tǒng)計學(xué)差異(F=211.606,p=0.000),C組(1.929±0.165cm)較A組(0.930±0.074cm)、B組(1.192±0.208cm)均增大,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.000)；B組較A組增大,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.00

8、0)。治療后,三組的腫瘤平均體積均較治療前增大,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(t=17.043、14.107、34.900,P=0.000)。
　　 3.治療前后CT灌注參數(shù)
　　 治療前,三組的CT灌注數(shù)據(jù)BF(47.010±9.704、48.025±9.824、44.095±8.749ml/100g.min)之間差異均不存在統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.935,p=0.399)。治療后,三組之間 BF 存在統(tǒng)計學(xué)差異(F=45.051,

9、p=0.000),且A組(75.161±5.306ml/100g.min)較B組(50.650±10.584ml/100g.min)、C組(50.037±9.708ml/100g.min)增大,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.000),C組和B組不存在統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.287)。治療后,A組、C組的BF較治療前增大,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(t=13.053、4.368,P=0.000)；B組較治療前增大,差異不存在統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.585,

10、P=0.129)。
　　 4.治療后三組的VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)、MVD(微血管密度)
　　 治療后,三組的VEGF、MVD均差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(F=482.531、620.175,P=0.000)。A組的VEGF、MVD(56.000±1.892、19.150±0.988個/視野)較B組(134.400±16.561、40.100±1.373個/視野)、C組(101.250±8.252、32.050±2.819個

11、/視野)減低,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；B組較C組增高,差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。
　　 第二部分TACE聯(lián)合抗血管生成治療肝癌的臨床應(yīng)用研究
　　 研究目的:
　　 研究CT灌注成像在評價TACE及TACE聯(lián)合抗血管生成藥物治療原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌療效的應(yīng)用價值,探討TACE聯(lián)合抗血管生成藥物治療肝細(xì)胞肝癌的可行性。
　　 資料與方法:
　　 1.病人資料 同意接受治療研究的

12、HCC患者40例(男34例,女6例,年齡39-75歲),按就診時序單雙數(shù)均分為A組與B組。A組患者接受常規(guī)TACE治療,B組患者接受TACE聯(lián)合抗血管生成藥物(恩度)治療。
　　 2.肝臟灌注CT 掃描 所有病例都在介入治療前一周內(nèi)、介入治療后2-4周內(nèi)分別行肝臟CT 灌注掃描,測量灌注參數(shù)值、腫瘤周邊血流量(BF)、血容量(BV)、毛細(xì)血管表面通透面積(PS)。
　　 3.介入治療前一周內(nèi)經(jīng)皮肝腫瘤穿刺活檢標(biāo)本由病理科

13、進(jìn)行VEGF、MVD免疫組織化學(xué)檢測。
　　 4.介入治療 A組常規(guī)TACE治療,藥物選擇用氟脲嘧啶脫氧核苷(FUDR)0.5-1.0mg、羥基喜樹堿5-10mg、奧沙利鉑300-600mg、超液化碘化油10-20ml。B組聯(lián)合治療,在常規(guī)TACE治療的基礎(chǔ)上加用恩度(Endostar/YH-16)30mg。
　　 5.治療后處理所有病例均在介入治療后14-28天內(nèi)再次 CT 灌注檢查,測量灌注參數(shù)BF、BV、PS,然后

14、行肝腫瘤切除手術(shù),部分未手術(shù)者動員再次肝穿,取得腫瘤組織行病理免疫組化VEGF、MVD檢查。
　　 6.統(tǒng)計學(xué)分析 先進(jìn)行重復(fù)方差分析,檢驗時間與分組是否存在交互效應(yīng)和主效應(yīng),然后進(jìn)行兩組間獨立樣本t檢驗和配對樣本t檢驗,比較兩組之間以及介入治療前后差異是否存在統(tǒng)計學(xué)意義,所有數(shù)據(jù)采用SPSS11.5軟件包進(jìn)行分析,取P<0.05為差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 研究結(jié)論:
　　 1、TACE術(shù)后腫瘤灶的血流灌注明顯

15、減少,說明TACE有效阻斷肝癌病灶現(xiàn)有血供。TACE術(shù)后腫瘤灶的VEGF、MVD明顯增高,反映TACE術(shù)后新生血管形成活躍,說明TACE 術(shù)后激活了腫瘤的自我救贖機(jī)制,促進(jìn)潛在血供的形成,所以TACE術(shù)后發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的幾率較高。
　　 2、TACE聯(lián)合恩度治療肝癌后,腫瘤灶的VEGF、MVD較單純TACE組明顯降低,說明恩度有效抑制了TACE術(shù)后的潛在新生血管形成,將有效降低TACE術(shù)后發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的幾率。
　　 3

16、、TACE聯(lián)合恩度治療肝癌后,腫瘤灶的血流灌注較治療前未見明顯降低,較單純TACE組升高,說明恩度主要直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,抑制潛在新生血管的形成；TACE聯(lián)合恩度治療后,殘存腫瘤灶因潛在血供無法建立,故腫瘤細(xì)胞無法進(jìn)行大量增殖,腫瘤間質(zhì)壓力因而明顯降低,所以反而使腫瘤灶的殘存有功能的微血管呈現(xiàn)相對高度灌注狀態(tài)。
　　 4、TACE聯(lián)合恩度治療肝癌后的VEGF、MVD、CT灌注參數(shù)變化,在兔VX2肝癌模型及臨床肝癌患者方面的表