復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者細(xì)胞免疫功能改變及卡介菌多糖核酸治療對其影響研究.pdf

1、目的： 1探討在復(fù)發(fā)性生殖器皰疹(recurrentgenitalherpes，RGH)發(fā)病中CD4+T和CD8+T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4的可能作用。 2探討B(tài)CG-PSN對RGH患者外周血T細(xì)胞亞群和CD4+T、CD8+T細(xì)胞中細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4表達(dá)水平的影響。 3探討RGH患者外周血PBMC中CD40、CD40L的表達(dá)狀況及BCG-PSN對其表達(dá)的影響。

2、 方法： 1采用流式細(xì)胞儀和ICCS法檢測了RGH患者發(fā)作期與發(fā)作間歇期外周血CD4+T、CD8+T細(xì)胞亞群及其IL-12、IFN-γ、IL-4的表達(dá)水平，并探討其與病程、復(fù)發(fā)次數(shù)間關(guān)系。 2采用流式細(xì)胞儀和ICCS法檢測了BCG-PSN治療前、后RGH患者外周血T細(xì)胞亞群與CD4+T、CD8+T細(xì)胞中細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4表達(dá)水平。 3采用流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測了RGH患者PBMC上CD40

3、、CD40L表達(dá)水平及使用BCG-PSN后它們的變化情況。 結(jié)果： 1.RGH患者細(xì)胞免疫功能變化 (1)發(fā)作期RGH患者外周血PBMC中CD3+T、CD4+T細(xì)胞百分率和CD4+/CD8+比值顯著降低。 (2)發(fā)作期RGH患者外周血IL-12、IFN-γ+-CD4+T、Th1/Th2顯著低于正常，IL-4+-CD4+T顯著高于正常。在發(fā)作間歇期IL-12+-CD4+T仍顯著低于正常。 (3)發(fā)作

4、期RGH患者外周血IL-12、IFN-γ+-CD8+T與Tc1/Tc2顯著低于正常。 在發(fā)作間歇期IFN-γ+-CD8+T和IL-12+-CD8+T顯著性低于正常。 (4)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理發(fā)現(xiàn)，發(fā)作期RGH的近半年復(fù)發(fā)次數(shù)與Th1、IL-12+-CD4+T和Th1/Th2呈負(fù)相關(guān)，而與Th2呈顯著正相關(guān)。 (5)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理發(fā)現(xiàn)，發(fā)作期RGH的近半年復(fù)發(fā)次數(shù)與Tc1、IL-12+-CD8+T和Tc1/Tc2呈負(fù)相關(guān)。

5、 2.BCG-PSN治療對RGH患者細(xì)胞免疫功能的影響 (1)經(jīng)BCG-PSN治療后，RGH患者外周血CD3+T、CD4+T細(xì)胞百分率顯著升高；對BCG-PSN組與病例對照組治療前后外周血CD3+T、CD4+T細(xì)胞百分率差值進(jìn)行比較，其差異有顯著性。 (2)經(jīng)BCG-PSN治療后，患者外周血IL-12、IFN-γ陽性CD4+T細(xì)胞百分率顯著升高，IL-4陽性CD4+T細(xì)胞百分率明顯下降；對BCG-PSN組與病例對

6、照組治療前后外周血IL-12、IFN-γ與IL-4陽性CD4+T細(xì)胞百分率差值進(jìn)行比較，其差異有顯著性。 (3)經(jīng)BCG-PSN治療后，患者外周血IL-12、IFN-γ陽性CD8+T細(xì)胞百分率顯著回升；BCG-PSN組與病例對照組治療前后外周血IL-12、IFN-γ陽性CD8+T細(xì)胞百分率差值比較，其差異有顯著性。 (4)臨床療效：BCG-PSN組的復(fù)發(fā)率明顯低于病例對照組；即使復(fù)發(fā)，其復(fù)發(fā)間隔時(shí)間明顯延長，復(fù)發(fā)皮損面積

7、顯著縮小，復(fù)發(fā)皮損痊愈時(shí)間明顯縮短。 3.RGH患者外周血單一核細(xì)胞協(xié)同刺激分子CD40/CD40L的表達(dá)及BCG-PSN治療對其影響 (1)RGH患者PBMC中CD40、CD40L陽性細(xì)胞百分率均顯著低于正常對照組。 (2)經(jīng)BCG-PSN治療后，RGH患者PBMC中CD40與CD40L的表達(dá)水平雖有所回升，但其間差異無顯著性。 結(jié)論： 1.RGH患者細(xì)胞免疫功能變化 (1)RGH患者在

8、發(fā)作期存在外周血T細(xì)胞總數(shù)和CD4+T細(xì)胞數(shù)下降。 (2)在發(fā)病過程中RGH患者外周血存在Th1向Th2漂移。Th1細(xì)胞水平越低，Th2細(xì)胞水平越高，則RGH復(fù)發(fā)越頻繁。RGH患者外周血存在CD4+T細(xì)胞IL-12的表達(dá)水平低下狀態(tài)，而且這種缺陷較難恢復(fù)；同時(shí)其表達(dá)水平愈低，RGH復(fù)發(fā)愈頻繁。 (3)近期反復(fù)發(fā)作的RGH患者外周血Tc1細(xì)胞水平低下，恢復(fù)延遲，而且Tc1/Tc2失衡越嚴(yán)重，RGH患者的復(fù)發(fā)越頻繁。

9、 (4)RGH患者外周血存在CD8+T細(xì)胞IL-12的表達(dá)低下的狀態(tài)，且其表達(dá)水平愈低下，RGH愈易復(fù)發(fā)。 2.BCG-PSN治療對RGH患者細(xì)胞免疫功能的影響 (1)BCG-PSN可明顯提高RGH患者外周血T細(xì)胞總數(shù)和CD4+T細(xì)胞數(shù)。 (2)BCG-PSN可顯著提高RGH患者外周血CD4+T細(xì)胞IL-12和IFN-γ的表達(dá)水平，下調(diào)Th2細(xì)胞IL-4的表達(dá)，從而有效改善Th1/Th2的失衡和IL-12水平低下

10、的狀態(tài)。 (3)BCG-PSN可有效誘導(dǎo)RGH患者外周血CD8+T細(xì)胞IFN-γ和IL-12的產(chǎn)生和分泌，顯著改善表達(dá)水平低下的狀況，從而使失衡的Tc1/Tc2恢復(fù)正常。 (4)BCG-PSN能顯著提高RGH臨床治愈率，有效減輕復(fù)發(fā)患者病情，對RGH具有較好的治療和預(yù)防復(fù)發(fā)的作用。 3.RGH患者外周血單一核細(xì)胞協(xié)同刺激分子CD40/CD40L的表達(dá)及BCG-PSN治療對其影響 (1)RGH患者存在CD4

11、0-CD40L共刺激作用低下，其可能是生殖器皰疹復(fù)發(fā)的重要原因之一。 (2)BCG-PSN對RGH患者PBMC中CD40/CD40L表達(dá)的免疫調(diào)節(jié)作用不甚明顯，尚需進(jìn)一步研究。 本課題的創(chuàng)新點(diǎn) 1.首次在單個T細(xì)胞水平上對RGH外周血CD4+T、CD8+T細(xì)胞細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ與IL-4同時(shí)進(jìn)行研究，并探討其與病情、病程及近半年復(fù)發(fā)次數(shù)間關(guān)系。首次探討了機(jī)體存在的Tc1/Tc2失衡在RGH復(fù)發(fā)中的意義