酮纈氨酸鈣與酮異亮氨酸鈣和消旋羥蛋氨酸鈣對人腎系膜細胞影響的研究.pdf

1、目的：體外觀察酮纈氨酸鈣、酮異亮氨酸鈣和消旋羥蛋氨酸鈣對人腎系膜細胞的影響。 方法：10mM酮纈氨酸鈣、酮異亮氨酸鈣和消旋羥蛋氨酸鈣對HMC細胞干預(yù)，采用MTT方法檢測干預(yù)后對細胞增殖的影響，生化方法檢測干預(yù)后LDH的變化，免疫組化檢測ATlR的表達改變，ELISA方法檢測干預(yù)后TGF-β1的變化，流式檢測干預(yù)后細胞周期的改變及凋亡。 結(jié)果：10mM消旋羥蛋氨酸鈣、酮纈氨酸鈣、酮異亮氨酸鈣干預(yù)HMC細胞，細胞出現(xiàn)生長增殖

2、抑制，并且細胞培養(yǎng)上清中LDH含量沒有增加，DMSO對照組與酮異亮氨酸鈣組和三種藥物共同干預(yù)組具有統(tǒng)計學(xué)差異，p<0.05，DMSO對照組與其它各實驗組之間并無統(tǒng)計學(xué)差異，p>0.05。消旋羥蛋氨酸鈣、酮纈氨酸鈣、酮異亮氨酸鈣干預(yù)后HMC細胞．ATlR表達較陰性對照組和DMSO組增加，而且，兩兩組合干預(yù)后HMC細胞ATlR表達較單一藥物干預(yù)未見明顯增加，三種藥物共同干預(yù)后HMC細胞ATlR表達較單一藥物干預(yù)有明顯增加。各實驗組TGF-β

3、1的含量較DMSO對照組增加。不論是單一藥物干預(yù)、兩兩組合及三種藥物共同干預(yù)，TGF-β1的含量均較對照組增加，P<0.01，而且兩兩藥物組合比單一藥物TGF-β1的含量升高，三種藥物共同干預(yù)組TGF-β1的含量升高更加明顯。為了進一步探詢藥物干預(yù)后細胞增殖抑制的可能機制，我們還進行了細胞流式分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同藥物干預(yù)后HMC細胞均出現(xiàn)了細胞周期G1期阻滯，同時還觀測到了細胞凋亡現(xiàn)象。有意思的是，單一藥物干預(yù)與DMSO對照細胞凋亡率無