Girdin在食管鱗癌中的表達及功能的研究.pdf

1、目的：
　　檢測Girdin在食管鱗癌組織中的表達，及其與食管癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。同時以食管鱗癌ECA109細胞株為研究對象，用針對Girdin的siRNA轉(zhuǎn)染細胞抑制Girdin的表達，探討其對ECA109細胞增殖及侵襲力的影響。
　　方法：
　　1、采用免疫組織化學(xué)法檢測94例食管癌和78例食管癌旁組織中Girdin的表達。對食管鱗癌組織中Girdin的表達與臨床病理因素及預(yù)后的關(guān)系進行統(tǒng)計學(xué)分析。

2、　　2、以食管癌ECA109細胞為研究對象，設(shè)計針對Girdin的siRNA，設(shè)立陰性對照組和空白對照組，將siRNA轉(zhuǎn)染入ECA109細胞，RT-PCR檢測siRNA轉(zhuǎn)染前后Girdin mRNA表達水平的變化。
　　3、采用MTT法觀察各實驗組細胞的增殖情況。
　　4、侵襲實驗檢測各實驗組細胞的侵襲力變化。
　　結(jié)果：
　　1、Girdin在食管鱗癌組織中高表達，而在癌旁組織中低表達，兩者有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。

3、Girdin高表達與患者年齡、性別、腫瘤部位無明顯相關(guān)性(P＞0.05)，但與T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期相關(guān)。Girdin蛋白陰性表達者5年生存率顯著高于陽性表達者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。單因素分析顯示食管癌患者5年生存率與T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、Girdin表達水平相關(guān)(P＜0.05)。多因素分析顯示Girdin表達水平及TNM分期為食管癌患者5年生存率的獨立影響因素。
　　2、轉(zhuǎn)染后24h，RT-PCR檢測結(jié)果顯示

4、，siRNA轉(zhuǎn)染組對GirdinmRNA的抑制率為76.52％，與其余兩組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　3、MTT結(jié)果顯示，在轉(zhuǎn)染24h、48h、72h后，細胞增殖抑制率分別為26.4％、37.24％、28.47％，較空白對照組明顯降低，差異有顯著意義(P＜0.01)。
　　4、侵襲實驗發(fā)現(xiàn)，實驗組穿膜細胞數(shù)（0.072±0.005），明顯少于空白組（0.260±0.012）及陰性對照組（0.238±0.00