FOXP3在小鼠動(dòng)脈粥樣硬化中的作用.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：FOXP3對(duì)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的影響
　　 目的:研究FOXP3對(duì)ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成的影響。
　　 方法:構(gòu)建FOXP3-siRNA 慢病毒載體，免疫磁珠分選Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞。用Western-blot方法對(duì)構(gòu)建的載體進(jìn)行功能性研究。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組注射FOXP3-siLUC 慢病毒(對(duì)照病毒)、FOXP3-siRNA

2、慢病毒注射組和Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞注射組。比較各組小鼠的斑塊面積和不同組織Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞的數(shù)目和功能；利用ELISA法檢測(cè)各組脾細(xì)胞炎性因子濃度；利用RT-PCR和Western-blot分析不同組織中FOXP3轉(zhuǎn)錄水平和Foxp3 蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:與對(duì)照組和Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞注射組比較，F(xiàn)OXP3-siRNA 慢病毒注射組小鼠斑塊面積明顯增加

3、；Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞的數(shù)目顯著減少，功能下降；Foxp3 蛋白表達(dá)和FOXP3轉(zhuǎn)錄水平降低。與對(duì)照組和FOXP3-siRNA 慢病毒注射組比較，輸注Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞組斑塊面積顯著減?。籉oxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞的數(shù)目顯著增加，功能增強(qiáng)；Foxp3蛋白表達(dá)和FOXP3轉(zhuǎn)錄水平增高；
　　 結(jié)論:FOXP3可能通過(guò)調(diào)控體內(nèi)炎癥反應(yīng)而產(chǎn)生抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。
　　

4、 第二部分：高脂對(duì)小鼠FOXP3的影響
　　 目的:研究高脂對(duì)小鼠FOXP3基因表達(dá)的影響。
　　 方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為對(duì)照組和高脂飲食組。構(gòu)建小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型，比較不同組小鼠血脂水平、斑塊面積和不同器官組織中Foxp3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞的數(shù)目；利用RT-PCR和Western-bloT分析組織中FOXP3轉(zhuǎn)錄水平和Foxp3 蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:與對(duì)照組比較，高脂飲食組小鼠血脂水平明顯