動(dòng)脈內(nèi)膜樹突狀細(xì)胞變化在尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化小鼠中作用.pdf

1、與普通人群相比，尿毒癥患者動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的心血管事件的發(fā)病率與死亡率顯著升高，成為尿毒癥患者的首位死因。尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化病變形成的時(shí)間更短，病變更重，其機(jī)制尚不完全清楚。目前已有多項(xiàng)研究證實(shí)樹突狀細(xì)胞(Dendriticcell，DC)在普通動(dòng)脈粥樣硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡加速性動(dòng)脈粥樣硬化、肺炎衣原體加速性動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的病理生理改變中起到關(guān)鍵作用，那么其是否也參與了尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化？尚未見相關(guān)研究，本文就此進(jìn)行了初

2、步探討。
　　目的:研究動(dòng)脈內(nèi)膜DC變化在尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化小鼠中作用。
　　方法:分別取30只6周齡雄性ApoE-/-C57小鼠，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組:羅格列酮治療組、尿毒癥組、動(dòng)脈硬化組，每組10只，飼以高脂飲食;另取10只6周齡雄性野生型C57小鼠，飼以普通飲食，為對(duì)照組。所有小鼠飼養(yǎng)普通飼料2周后開始建模，ApoE-/-小鼠每天飼以高脂飲食(配方:普通飼料79.8％，豬油20％，膽固醇0.2％)，促進(jìn)動(dòng)脈

3、斑塊形成;C57小鼠飼以普通飲食。治療組及尿毒癥組行腎臟大部分損毀術(shù)，即8周齡時(shí)行背部右后外側(cè)2cm切口進(jìn)行皮質(zhì)電灼術(shù)，2周后，行左側(cè)腎臟切除，對(duì)照組及動(dòng)脈硬化組行假手術(shù)。術(shù)后6周，治療組予以羅格列酮20 mg/(kg·d)灌胃治療，其余兩組予以等量生理鹽水灌胃，共治療5周后干預(yù)治療結(jié)束。檢測(cè)BUN、TC、TG等生化指標(biāo)，觀察造模是否成功;Western blot檢測(cè)主動(dòng)脈內(nèi)成熟DC數(shù)量;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)脾臟中成熟DC數(shù)量;Elisa檢

4、測(cè)外周血IL-12p70水平。
　　結(jié)果:尿毒癥組與動(dòng)脈硬化組比較，BUN顯著升高，動(dòng)脈內(nèi)膜斑塊面積分?jǐn)?shù)增大(P＜0.05)，動(dòng)脈內(nèi)膜中成熟DC表達(dá)增多(P＜0.05)，說明尿毒癥組加速了動(dòng)脈粥樣硬化病程，造模成功。尿毒癥組較動(dòng)脈硬化組中成熟DC增多，同時(shí)伴隨有更為嚴(yán)重的粥樣硬化斑塊形成(P＜0.05)，目前大量研究已證實(shí)DC在普通動(dòng)脈粥樣硬化中的重要作用，在疾病進(jìn)展過程中，其從外周淋巴組織遷移至動(dòng)脈管壁，加重動(dòng)脈病變，我們考慮在

5、合并有尿毒癥導(dǎo)致的免疫紊亂中，更多的DC遷移入動(dòng)脈內(nèi)膜中，增生活化，加重動(dòng)脈病變;脾臟中成熟DC表達(dá)減少[CD11c:(3.06±0.07)％ vs(5.04±0.13)％，CD83:(6.96±0.06)％ vs(11.48±0.14)％，P＜0.05]， IL-12p70分泌減少[(57.11±3.11 vs116.00±8.72)ng/L，P＜0.05]，說明在尿毒癥情況下，外周淋巴器官中DC的數(shù)量及活性均降低，這與眾所周知的尿毒

6、癥相關(guān)性免疫缺陷狀態(tài)相一致;而在動(dòng)脈硬化的條件下，外周DC則處于數(shù)量增多，明顯活化的狀態(tài)，與目前公認(rèn)的動(dòng)脈粥樣硬化存在免疫激活相一致。PPARγ(Peroxisome proliferator activated receptorγ，過氧化物酶體增殖物激活受體γ)是一種表達(dá)于DC上的重要功能受體，其在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用，目前受到廣泛關(guān)注。在動(dòng)脈粥樣硬化中，激活該受體，可通過多種途徑抑制DC最終起到抗AS的作用。因此我們?cè)O(shè)立PPARγ激

7、動(dòng)劑羅格列酮治療組以便抑制DC的成熟和活化，觀察DC的功能狀態(tài)對(duì)尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化的影響。我們發(fā)現(xiàn)，羅格列酮治療組與尿毒癥組比較，動(dòng)脈內(nèi)膜斑塊面積分?jǐn)?shù)減少(P＜0.05)，動(dòng)脈內(nèi)膜中成熟DC數(shù)量減少(P＜0.05)，脾臟中成熟DC數(shù)量減少[CD11c:(1.22±0.02)％ vs(3.06±0.07)％，CD83:(3.12±0.10)％ vs(6.96±0.06)％， P＜0.05]，IL-12p70分泌減少[(34.25±1

8、1.27 vs57.11±3.11)ng/L，P＜0.05]，但血脂水平并無(wú)明顯差異;這就說明PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮改善尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化的作用與其抑制DC相關(guān)，而血脂水平可能在尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化中并不是主要的加速原因。羅格列酮治療組的動(dòng)脈內(nèi)膜中成熟DC減少，說明在尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化小鼠中，動(dòng)脈內(nèi)膜增生程度與內(nèi)膜中成熟DC數(shù)量成正相關(guān)，進(jìn)一步說明了DC在局部的功能狀態(tài)在尿毒癥加速性動(dòng)脈粥樣硬化中的重要作用。羅格列酮治