磷酸鞘氨醇信號系統(tǒng)在輸卵管舒縮活動中的作用.pdf

1、目的:本課題通過研究輸卵管中是否存在鞘氨醇激酶1(sphingosine kinases1，SphK1)/1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine1-phosphate，S1P)信號途徑的表達(dá)、S1P在輸卵管妊娠中的表達(dá)是否有所變化、是否影響了輸卵管的生理功能，以了解S1P的代謝是否與輸卵管妊娠的發(fā)病具有相關(guān)性。
　　方法:人輸卵管的準(zhǔn)備以及利用免疫印跡技術(shù)、免疫組化技術(shù)檢測SphK1與1-磷酸鞘氨醇受體1(Sphingosine1

2、-phosphate receptor1，S1P1)的表達(dá)與定位;ELISA檢測S1P在正常妊娠輸卵管及輸卵管妊娠輸卵管中的不同聚集濃度;肌條張力測定了解S1P對于輸卵管平滑肌收縮的影響。
　　結(jié)果:免疫印跡技術(shù)檢測顯示人輸卵管中存在SphK1與S1P1的表達(dá)，并且這種表達(dá)在輸卵管妊娠者的輸卵管中明顯增強(qiáng)。免疫組化結(jié)果表明，SphK1與S1P1均表達(dá)于輸卵管上皮細(xì)胞，此外，輸卵管的平滑肌細(xì)胞也表達(dá)S1P1。上述結(jié)果表明，輸卵管中存

3、在著完整的S1P的代謝信號通路。S1P在正常妊娠輸卵管的濃度為381.6±19.4ng/L(n=8)，在輸卵管妊娠者的輸卵管，S1P的濃度明顯下降至19.4±2.8 ng/L(p=0.002，輸卵管妊娠者輸卵管vs.正常妊娠輸卵管;n=8)，說明S1P可能參與了輸卵管妊娠發(fā)病過程的調(diào)節(jié)。我們?yōu)檫M(jìn)一步了解S1P信號通路在輸卵管中的生理作用，使用外源性S1P作用于離體的輸卵管，以了解S1P對輸卵管自主收縮的影響。結(jié)果顯示，S1P對于鼠及人類

4、輸卵管的自主收縮均有促進(jìn)作用。SphK1可以促進(jìn)S1P的產(chǎn)生。為更好地了解細(xì)胞內(nèi)所產(chǎn)生的S1P的作用，我們使用了一種SphK1的抑制劑N，N-二甲基鞘氨醇(N，N-Dimethyl-D-erythro-sphingosine，DMS)，作用于離體的輸卵管，發(fā)現(xiàn)輸卵管的自主收縮受到了抑制。揭示了內(nèi)源性的脂質(zhì)代謝通路在維持輸卵管自主收縮中的作用。
　　結(jié)論:S1P代謝信號通路存在于人的輸卵管中，S1P可以促進(jìn)輸卵管的自主收縮，輸卵管中