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1、紫花苜蓿在世界范圍內(nèi)分布廣泛,是世界公認(rèn)的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)牧草,被譽(yù)為“牧草之王”。近年來(lái)隨著我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展,對(duì)優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的需求不斷擴(kuò)大,為解決蛋白質(zhì)飼料的問題,全國(guó)包括南方地區(qū)的紫花苜蓿種植面積在迅速增加,而苜蓿中的次生代謝物質(zhì)皂甙含量過高,對(duì)畜禽不利,它抑制單胃動(dòng)物的生長(zhǎng),使反芻動(dòng)物發(fā)生瘤胃臌氣。也有研究報(bào)道苜蓿皂甙在降低血液中膽固醇和抗動(dòng)脈粥樣硬化方面具有藥用活性。還可以從苜蓿中提取苜蓿皂甙作為動(dòng)物新型飼料添加劑。國(guó)內(nèi)關(guān)于苜蓿皂甙含量變
2、異的研究報(bào)道較少,而對(duì)苜蓿皂甙遺傳力的研究還未見報(bào)道。本研究從優(yōu)化苜蓿總皂甙含量測(cè)定方法入手,通過正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定超聲波法對(duì)苜蓿皂甙的最佳提取工藝條件,然后研究苜蓿不同刈割期、不同生育期和植株不同部位總皂甙含量的變化,同時(shí)對(duì)苜蓿品種間和品種內(nèi)總皂甙含量的變異及其遺傳力進(jìn)行研究,為制定能夠?qū)崿F(xiàn)苜蓿某一皂甙含量目標(biāo)的有效栽培、利用和育種新技術(shù)提供理論依據(jù)。本研究結(jié)果表明: 1.確立了苜??傇磉昂繙y(cè)定方法: 以苜蓿常春藤皂甙
3、為標(biāo)準(zhǔn)品,采用紫外分光光度法測(cè)定苜蓿總皂甙的含量,確定了苜蓿皂甙的最大吸收波長(zhǎng)為544nm,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.0262X+0.0007,平均回收率為100.162﹪,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.75,該方法具有操作簡(jiǎn)便,重現(xiàn)性好,精密度高等優(yōu)點(diǎn)。 2.優(yōu)化了超聲波法提取苜??傇磉白钸m條件: 采正交表L9(34),選用影響提取效果的四個(gè)主要因素,即甲醇醇濃度、固液比、超聲提取時(shí)間、超聲提取次數(shù),每個(gè)因素設(shè)三個(gè)水平進(jìn)行正交試
4、驗(yàn)。結(jié)果表明:四個(gè)因素對(duì)總皂甙含量的影響均具有極顯著性差異(P<0.01)。苜蓿皂甙的最佳提取條件為A3B3C3D2,即70﹪的甲醇,固液比為1∶15,超聲提取2次,每次30min。 3.苜蓿不同刈割期總皂甙含量的變化 苜蓿不同刈割期總皂甙含量測(cè)定結(jié)果表明:苜蓿不同茬次之間總皂甙的含量差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。不同茬次總皂甙含量高低順序依次為:第三茬>第四茬>第一茬>第二茬。苜蓿不同茬次與不同品種之間的皂甙含量
5、互作達(dá)到極限著水平(P<0.01)。 4.苜蓿不同生育期總皂甙含量的變化 苜蓿不同生育期皂甙含量測(cè)定結(jié)果表明:苜蓿不同生育期總皂甙含量的差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。不同生育期總皂甙含量高低順序依次為:現(xiàn)蕾期>初花期>盛花期>結(jié)莢期。苜蓿不同生育期同不同品種間的皂甙含量互作不顯著(P>0.05)。 5.苜蓿植株不同部位總皂甙含量的變化 苜蓿植株不同部位總皂甙含量存在很大差異,差異達(dá)到極顯著水平(P<
6、0.01)。苜蓿植株不同部位皂甙含量的高低依次為:葉片>根>莖。 6.研究了苜蓿品種間總皂甙含量的變異及其遺傳力 測(cè)定了從國(guó)外引進(jìn)的22個(gè)苜蓿品種的總皂甙含量。結(jié)果表明:苜蓿不同品種間總皂甙的含量差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01),苜蓿品種間皂甙含量存在遺傳變異。苜蓿總皂甙含量在0.829﹪到1.386﹪之間變化,皂甙含量高的品種主要有Tachiwakaba,Caliverde和Provence;皂甙含量低的品種為Wil
7、liamsburg和PoolrampaurR90。 7.研究了苜蓿品種內(nèi)總皂甙含量的變異 測(cè)定了紫花苜蓿新品系西農(nóng)一號(hào)的總皂甙含量。結(jié)果表明:品種內(nèi)總皂甙的含量差異達(dá)到極顯著水平(P<0.01),表明苜蓿品種內(nèi)的皂甙含量也存在遺傳變異。 8.苜蓿皂甙遺傳力的估算 采用選拔效應(yīng)的方法估算出苜蓿高皂甙性狀的遺傳力H2G為0.314;低皂甙性狀的遺傳力為H2D為0.391。估算表明:苜蓿皂甙性狀的遺傳力比較低,
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