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1、目的: 比較患側(cè)電針、健側(cè)電針、雙側(cè)電針對(duì)坐骨神經(jīng)慢性擠壓傷(CCI)大鼠脊髓中P物質(zhì)(SP)、NK1受體、P2X3表達(dá)的影響,探討單雙側(cè)取穴電針鎮(zhèn)痛的神經(jīng)化學(xué)機(jī)制。 方法: 將70只雄性SD大鼠復(fù)制坐骨神經(jīng)慢性擠壓傷(CCI)模型成功后,隨機(jī)分為假模組(J組)、對(duì)照組(A組)、患側(cè)電針組(B組,取患側(cè)足三里、陽陵泉穴)、健側(cè)電針組(C組,取健側(cè)足三里、陽陵泉穴)、雙側(cè)電針組(D組,取雙側(cè)足三里、陽陵泉穴)。各電
2、針組治療9天后,觀察電針前后痛閾變化;分別采用免疫組織化學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)技術(shù)法檢測(cè)脊髓背角中SP、NK1、P2X3的表達(dá)。 結(jié)果: 1、造模后大鼠行為表現(xiàn):與J組相比,A、B、C、D組造模后第一天大鼠行走時(shí)右下肢拖動(dòng),不能抬離地面,安靜時(shí)足呈輕度外翻狀,足趾不能承重。至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),多數(shù)大鼠跛行癥狀有所緩解,但安靜時(shí)仍有足呈輕度外翻狀、懸空等后肢保護(hù)現(xiàn)象。造模后各組大鼠第五天的熱縮足反射潛伏期(TW
3、L)均短于J組。 2、電針對(duì)大鼠痛閾的影響:與A組比較,B、C、D組大鼠電針前后痛閾變化差值(即電針9天后與電針前TWL差值)具有顯著差異(P<0.01);治療組之間比較,D組大鼠痛閾變化值分別與B、C各組比較均具有顯著差異(P<0.01);B、C組之間痛閾變化差值沒有差異(P>0.05)。 3、電針對(duì)SP陽性反應(yīng)物表達(dá)的影響:與A組比較,B、C、D組大鼠電針前后脊髓背角中SP陽性反應(yīng)物總IOD值均有明顯減少,具有顯著差
4、異(P<0.01);治療組之間比較,D組大鼠脊髓背角中SP陽性反應(yīng)物總IOD值較B、C兩組均有不同程度減少,具有顯著差異(P<0.01)。B、C組之間大鼠脊髓背角中SP陽性反應(yīng)物總IOD值B組 5、角中NK1陽性反應(yīng)物總IOD值沒有差異(P>0.05)。 5、電針對(duì)P2X3陽性反應(yīng)物表達(dá)的影響:與A組比較,B、C、D組大鼠脊髓背角中P2X3陽性反應(yīng)物總IOD值均有不同程度減少,具有顯著差異(P<0.01),治療組B、C、D組之間比較,大鼠脊髓背角中P2X3陽性反應(yīng)物總IOD值沒有差異(P>0.05)。 6、SP、NK1、P2X3含量與痛閾差值相關(guān)性分析:大鼠脊髓背角中SP、NK1、P2X3陽性反應(yīng)物IOD值分別與造 6、模后第14天與第5天的痛閾差值具有顯著相關(guān)性(P<0.01)。 7、電針對(duì)大鼠脊髓背角SP基因表達(dá)的影響:B、C、D各電針治療組與A組比較:B、C、D各組P物質(zhì)基因和β-actin光密度比值較A組有不同程度降低,具有顯著差異(P<0.01);B、C、D各電針治療組之間比較顯示:SP基因和β-actin光密度比值D組 7、針治療組與A組比較:B、C、D各組NK1基因和β-actin光密度比值較A組有不同程度降低,具有顯著差異(P<0.01);B、C、D各電針治療組之間比較顯示;NK1和β-actin光密度比值D組 8、C、D各電針治療組之間比較顯示:P2X3和β-actin光密度比值D組0.05)。10、SP、NK1、P2X3基因與痛閾差值相關(guān)性分析:大鼠脊髓背角中SP、NK1、P2X3基因與β-actin光密度比值分別與造模后第14天與第5天的痛閾差值具有顯著相關(guān)性(P<0.01)。 11、SP基因分別NK1、P2X3基因相關(guān)性分析:大鼠脊髓背角中SP基因/β-actin光密度比值與NK1基因/β-act 9、in光密度比值具有顯著相關(guān)性(P<0.01);大鼠脊髓背角中SP基因/β-actin光密度比值與P2X3基因/β-actin光密度比值具有顯著相關(guān)性(P<0.01)。 結(jié)論: 1、電針療法分別應(yīng)用于大鼠患側(cè)、健側(cè)、雙側(cè)足三里和陽陵泉穴,可能通過抑制大鼠脊髓背角中SP、NK1基因的表達(dá)和大鼠脊髓背角中相應(yīng)遞質(zhì)的含量,降低兩者結(jié)合的幾率,產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用。 2、電針大鼠足三里、陽陵泉穴可抑制脊髓背角中P2X3基因的表達(dá)和 10、相應(yīng)遞質(zhì)的含量,產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用。但是其鎮(zhèn)痛機(jī)理是否為SP與P2X3之間相互作用,有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。 3、三種取穴方法中,尤以雙側(cè)取穴電針療法對(duì)大鼠脊髓背角中SP含量及其基因表達(dá)的抑制作用最強(qiáng),相應(yīng)的鎮(zhèn)痛作用也最明顯;患側(cè)取穴較健側(cè)取穴電針對(duì)SP在脊髓背角中含量及基因的表達(dá)的抑制作用好,但鎮(zhèn)痛作用沒有差異。 4、三種取穴方法電針對(duì)CCI模型大鼠脊髓背角中NK1基因表達(dá)及其含量的抑制作用沒有差異。 5、三種取穴方法電
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