電針治療緩解CCI模型大鼠的疼痛和抑郁并抑制ACC腦區(qū)中ERK1-2的活化.pdf

1、目的：
　　電針通過(guò)給予脈沖電流刺激穴位，是一種有效的止痛治療方式。許多脊髓上結(jié)構(gòu)，包括前扣帶回皮層(ACC)，參與電針抑制神經(jīng)病理性疼痛的作用機(jī)制。ACC腦區(qū)中的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(ERK1/2)在調(diào)節(jié)慢性神經(jīng)病理性疼痛的情感反應(yīng)中起重要作用。在本研究中，研究電針刺激大鼠的“足三里”、“陽(yáng)陵泉”對(duì)慢性縮窄性損傷(CCI)誘導(dǎo)的痛覺(jué)過(guò)敏和抑郁行為的影響，同時(shí)探索電針引起CCI模型大鼠ACC腦區(qū)中ERK1/2的活化水平的變化情

2、況。
　　方法：
　　1、觀察電針對(duì)CCI大鼠的痛覺(jué)過(guò)敏的影響。將SD大鼠隨機(jī)分為四組:對(duì)照組+假電針組（Control+shamEA）、對(duì)照組+電針組(Control+EA)、CCI造模組+假電針組（CCI+shamEA）、CCI造模組+電針組（CCI+EA）。每組分別于術(shù)后第1天至14天同側(cè)給予電針刺激治療。分別于術(shù)前、術(shù)后第1、3、5、7、10、14、21、28和35天測(cè)量熱縮足反射潛伏期(PWL)和機(jī)械縮足反射閾值(

3、PWT)。
　　2、觀察電針對(duì)CCI大鼠的抑郁行為的影響。將SD大鼠隨機(jī)分為四組:Control+shamEA、Control+EA、CCI+shamEA、CCI+EA。每組分別于術(shù)后第1天至14天同側(cè)給予電針刺激治療。分別于術(shù)前、術(shù)后第7、14、21、28和35天用FST來(lái)測(cè)量懸浮時(shí)間。
　　3、觀察電針對(duì)CCI大鼠ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的影響。將SD大鼠隨機(jī)分為四組:Control+shamEA、Control

4、+EA、CCI+shamEA、CCI+EA。每組分別于術(shù)后第1天至14天同側(cè)給予電針刺激治療。用蛋白電泳和免疫組化分別于術(shù)后28天、35天檢測(cè)ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的變化。
　　4、觀察ACC內(nèi)注射U0126對(duì)CCI大鼠痛覺(jué)過(guò)敏和抑郁行為的影響和ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的影響。CCI造模，分別從術(shù)后第21天至27天或術(shù)后第28天至34天注入U(xiǎn)0126或DMSO。分別檢測(cè)術(shù)后第28天、35天的PWL和PWT、FST

5、的懸浮時(shí)間。用蛋白電泳分別于術(shù)后第28天、35天檢測(cè)ACC腦區(qū)中ERK1/2活化水平的變化。
　　5、觀察CCI大鼠中ERK1/2活化的亞細(xì)胞定位。CCI造模術(shù)后7天取材，免疫熒光雙重染色方法檢測(cè)p-ERK1/2在星形膠質(zhì)細(xì)胞(GFAP)、小膠質(zhì)細(xì)胞(Iba1)和神經(jīng)元(NeuN)中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、早期規(guī)律和持續(xù)的電針治療（術(shù)后第1天至第14天），可減輕CCI誘導(dǎo)的熱和機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏，和CCI+sha

6、mEA組相比，在術(shù)后第5天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05)，作用均持續(xù)超過(guò)術(shù)后35天。
　　2、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CCI引起大鼠術(shù)后28天和35天懸浮時(shí)間增加(p＜0.001)，早期規(guī)律和持續(xù)的電針治療（術(shù)后第1天至第14天）可逆轉(zhuǎn)CCI誘導(dǎo)的大鼠懸浮時(shí)間的增加(p＜0.01)。
　　3、蛋白印跡和免疫組化的結(jié)果均顯示，在CCI術(shù)后28天和35天，ACC腦區(qū)中p-ERK1/2的表達(dá)上調(diào)，與Control+shamEA相比(p

7、＜0.001);早期規(guī)律電針治療，可抑制CCI引起的ACC腦區(qū)中ERK1/2的活化(p＜0.05)。
　　4、蛋白印跡顯示，CCI術(shù)后第21天至第27天持續(xù)向ACC中注射U0126，可抑制CCI引起的術(shù)后28天和35天ACC中p-ERK1/2表達(dá)的增加(p＜0.001)。對(duì)CCI引起的熱和機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏沒(méi)有影響。但可顯著逆轉(zhuǎn)CCI誘導(dǎo)的術(shù)后第28天和第35天大鼠的懸浮時(shí)間的增加(P＜0.01)。
　　5、免疫熒光雙重染色顯示在