加巴噴丁治療雙側CCI大鼠神經(jīng)病理性疼痛機制研究.pdf

1、前言:
　　神經(jīng)病理性疼痛在普通人群中的發(fā)病率已超5％，是全球重大公共衛(wèi)生問題之一，其病因機制復雜，尚缺乏有效的治療措施。在本課題組前期研究中，已發(fā)現(xiàn)神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓背角miR-203的表達水平顯著下降;利用蛋白質組學方法篩選出蛋白磷酸酶1催化亞基β異構體(PPP1CB)等多種蛋白質表達水平發(fā)生了改變。PPP1CB是一種與學習記憶等神經(jīng)功能相關的蛋白催化亞基，可能在神經(jīng)病理性疼痛機制中發(fā)揮著作用。
　　目的:
　

2、　本研究選用雙側坐骨神經(jīng)結扎大鼠作為神經(jīng)病理性疼痛模型，利用加巴噴丁對大鼠進行治療，旨在明確加巴噴丁對bCCI大鼠的治療效果，以及加巴噴丁治療對bCCI大鼠脊髓背角PPP1CB的表達影響及其與miR-203之間的關系。
　　方法:
　　48只180-200gSD雌性大鼠，被隨機分為4組:
　?、貼a(i)ve組(N=12);
　?、赟HAM組(N=12):進行大鼠雙側假手術;
　?、踒CCI組(N=12):

3、建立大鼠雙側CCI模型;
　?、躡CCI+GBP組(N=12):bCCI術前15分鐘一次、術后第7天起每日兩次，給予加巴噴丁100mg/Kg腹腔注射，連續(xù)7天。
　　監(jiān)測大鼠的體重、機械刺激誘發(fā)痛、熱刺激誘發(fā)痛和冷刺激誘發(fā)痛等行為學指標，來判斷是否建模成功以及加巴噴丁的鎮(zhèn)痛效果。術后第14天處死大鼠，留取脊髓背角(L4-L6)標本，分別利用Real-TimePCR與western-blot檢測PPP1CB的mRNA及蛋白質表

4、達水平變化，并進行了生物信息學分析。
　　結果:
　　1.雙側坐骨神經(jīng)結扎(bCCI)模型大鼠雙足熱刺激誘發(fā)痛痛閾、機械刺激誘發(fā)痛痛閾及丙酮法冷刺激縮足反射閾閾值較正常對照組、假手術組顯著降低，體重顯著下降。術后第7天開始加巴噴丁100mg/Kgbid干預后，bCCI+GBP大鼠體重、雙足冷刺激誘發(fā)痛閾值與bCCI未干預組無顯著差異，而雙足熱刺激誘發(fā)痛閾值、機械刺激縮足反射閾值均較未干預組有顯著恢復。
　　2.在雙側坐

5、骨神經(jīng)結扎模型中，大鼠脊髓背角(L4-L6)PPP1CB蛋白表達水平較正常對照組、假手術組有顯著上升，約2倍左右，而PPP1CB mRNA表達水平則顯著下降約0.8倍左右。術后第7天開始加巴噴丁100mg/Kgbid干預后，bCCI+GBP組大鼠脊髓背角(L4-L6)PPP1CB蛋白表達水平較未干預組有顯著回落，但未恢復到正常對照組、假手術組水平，而PPP1CB mRNA表達水平則較未干預組有顯著回升，恢復到與正常對照組、假手術組相同水

6、平。
　　3.利用生物信息學，驗證了miR-203對PPP1CB的調控關系，解釋了PPP1CB在脊髓背角的差異表達可能是因為miR-203本身對PPP1CB起到負向調控作用，而bCCI大鼠脊髓背角miR-203的減少導致了PPP1CB蛋白表達水平的上升。
　　結論:
　　1.加巴噴丁可以緩解神經(jīng)病理性疼痛大鼠雙足對熱敏、機械敏感的癥狀，但對冷刺激感覺異常無效果。
　　2.加巴噴丁可以改變大鼠脊髓背角PPP1CB的