淋球菌mtrR基因調(diào)控區(qū)刪除突變與淋球菌耐藥關(guān)系的研究.pdf

1、第一部分:淋球菌mtrR調(diào)控區(qū)突變片段的體外重組和鑒定;目的:臨床淋球菌的基因表型存在著較大的差異,不同來(lái)源的淋球菌株之間 的可比性小.該實(shí)驗(yàn)旨在體外重組一突變DNA片段.用其轉(zhuǎn)染臨床 淋菌株,產(chǎn)生特異位點(diǎn)——mtrR調(diào)控區(qū)突變的轉(zhuǎn)染株.結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)采用基因剪接技術(shù)(SOEing)通過(guò)DNA片段的重疊延伸,在 體外直接進(jìn)行重組并擴(kuò)增大量的突變片段.該實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)單易操作而 且突變率可達(dá)100﹪.用PCR反應(yīng)擴(kuò)增突變產(chǎn)物可為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供充

2、足的轉(zhuǎn)染用DNA片段.第二部分:淋球菌mtrR基因調(diào)控區(qū)刪除突變與淋球菌耐藥關(guān)系的研究;目的:Mtr外排系統(tǒng)可介導(dǎo)淋球菌對(duì)多種疏水性抗菌劑產(chǎn)生耐藥.而MtrR可 下調(diào)mtrCDE基因的轉(zhuǎn)錄水平.該試驗(yàn)試圖分析淋球菌的mtrR基因調(diào) 控區(qū)刪除突變、MtrCDE基因轉(zhuǎn)錄水平及多藥耐藥三者之間的關(guān)系.討論:該試驗(yàn)所設(shè)計(jì)的突變不僅破壞了位于mtrR基因調(diào)控子中的13 bp反向 重復(fù)序列的完整性,而且改變了mtrR轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)區(qū)的結(jié)構(gòu).將突變片段 E