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文檔簡介
1、淋病奈瑟菌(簡稱淋球菌)是淋病的病原體,可引起尿道炎、宮頸炎等。阿奇霉素是我國尿道炎、宮頸炎常用治療藥物之一,臨床癥狀不典型的淋病患者可能只接受到阿奇霉素治療,故開展淋球菌對阿奇霉素的敏感性監(jiān)測是非常有意義的。與阿奇霉素不同,頭孢曲松作為目前淋病一線治療藥物,一直是我國淋球菌耐藥監(jiān)測藥物之一,監(jiān)測結果顯示近年來淋球菌對頭孢曲松的敏感性下降趨勢比較明顯,故開展淋球菌對頭孢曲松的耐藥機制研究顯得越來越重要。淋球菌多抗原序列分型方法(NG-M
2、AST)是一種操作簡便、分型能力強的基因分型方法,本研究應用NG-MAST方法分析耐阿奇霉素淋球菌和頭孢曲松低敏株的基因型別和菌株間的進化關系,為淋病防治工作提供參考依據(jù)。全文分為3個部分,各部分的主要內容簡述如下:
第一部分南京和重慶地區(qū)淋球菌對阿奇霉素的敏感性測定
本部分旨在了解南京和重慶地區(qū)淋球菌對阿奇霉素的敏感性。選取2008年及2009年南京和重慶地區(qū)分離的318株淋球菌,采用瓊脂稀釋法測定阿奇霉素
3、、頭孢曲松、大觀霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星對這318株淋球菌的最低抑菌濃度(MIC),耐阿奇霉素淋球菌定義為每批實驗中大于或等于阿奇霉素對質控菌株WHO P(阿奇霉素耐藥株)的MIC值的菌株。318株淋球菌中有17株(5.3%)淋球菌對阿奇霉素耐藥。
第二部分耐阿奇霉素淋球菌的NG-MAST基因分型研究
本部分旨在了解南京和重慶地區(qū)耐阿奇霉素淋球菌的基因型別和菌株間的進化關系。對第一部分檢測出的17株耐阿奇霉素淋
4、球菌進行NG-MAST基因分型,并利用Mega軟件作進化樹分析。17株耐阿奇霉素淋球菌共有11種NG-MAST基因型別,其中5種為新注冊的基因型別。有6株菌的基因型別(ST)為ST3356,2株高度耐阿奇霉素的菌株(MIC>64mg/L)具有相同的基因型別ST1866?;蛐蛣eST3367及4種新注冊的基因型別與菌株數(shù)最多的基因型別ST3356親緣關系較近,可能均為短傳播鏈上同一來源菌株。
第三部分頭孢曲松低敏淋球菌的pe
5、nA、porB、mtrR基因多態(tài)性研究
本部分旨在了解pernA、porB、mtrR基因多態(tài)性在淋球菌對頭孢曲松敏感性下降中的作用。選取第一部分檢測出的17株頭孢曲松低敏株和4株頭孢曲松敏感株進行penA、porB、mtrR基因測序和NG-MAST基因分型。21株淋球菌的penA基因編碼的青霉素結合蛋白2(PBP2)中共發(fā)現(xiàn)9種氨基酸結構模式,其中2種未報道過。有8株頭孢曲松低敏株中存在XVⅢ型PBP2,有4株頭孢曲松低敏
6、株中存在XⅢ型PBP2,未發(fā)現(xiàn)鑲嵌狀結構模式(X) PBP2。有18株淋球菌含有porB1b基因(編碼PorB1b蛋白),PorB1b中I218M、M257T/M257R和G259V氨基酸置換都只在頭孢曲松低敏株中出現(xiàn)。21株淋球菌的mtrR基因編碼的MtrR中存在A39T或G45D或H105Y氨基酸置換,A39T氨基酸置換只在3株頭孢曲松低敏株中出現(xiàn),G45D或H105Y氨基酸置換在頭孢曲松低敏株和頭孢曲松敏感株中均出現(xiàn)。17株頭孢曲
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