復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清干預(yù)TGF-β-,1-影響大鼠離體肝星形細(xì)胞活化的研究.pdf

1、肝纖維化是機(jī)體對于慢性肝損傷的一種修復(fù)性應(yīng)答,也是各種慢性肝病向肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段.在多種細(xì)胞及細(xì)胞因子參與下,引起細(xì)胞外基質(zhì)(extracelluar matrix,ECM)的合成與降解失衡,導(dǎo)致ECM過度沉積被普遍認(rèn)為是肝纖維化發(fā)生的主要機(jī)制.現(xiàn)已證實(shí),肝星形細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝臟產(chǎn)生ECM的主要細(xì)胞,HSC的激活是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié).各種損肝因素導(dǎo)致肝損傷,繼而引起肝細(xì)胞壞死及炎癥刺

2、激,相關(guān)細(xì)胞分泌各種細(xì)胞因子激活HSC,產(chǎn)生大量的ECM,導(dǎo)致ECM生成大于降解,以致ECM過度沉積引起肝纖維化.HSC的激活受多種細(xì)胞因子(cytokine,CK)的調(diào)控,已知血小板衍生生長因子(platelet derived growth factor,PDGF)、胰島素樣生長因子-Ⅰ(insulin-like growth factor,IGF-Ⅰ)、轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor,TGF-β

3、)等均屬關(guān)鍵的CK.近十多年的研究顯示,中醫(yī)藥抗肝纖維化臨床效果較好,加之毒副作用較低而前景廣闊.該實(shí)驗(yàn)采取的復(fù)方鱉甲軟肝方由鱉甲、黨參等十一味中藥組成,可扶正祛邪,活血化瘀.其臨床有效率達(dá)81.67％,治愈率達(dá)55.23％,系國家級(jí)中藥新藥(批準(zhǔn)文號(hào):國藥準(zhǔn)字1999,2-102號(hào)),已上市.實(shí)驗(yàn)在細(xì)胞培養(yǎng)體系中添加TGF-β<,1>以刺激HSC充分活化,觀察TGF-β<,1>所導(dǎo)致的HSC生物學(xué)行為的改變,以及復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清

4、的干預(yù)作用.目的在于進(jìn)一步深入探討復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清影響HSC活化的作用機(jī)制.1.復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清對活化的HSC自分泌TGF-β 1的實(shí)驗(yàn)研究;2.復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清干預(yù)TGF-β<,1>影響HSC增殖作用的實(shí)驗(yàn)研究;3.復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清干預(yù)TGF-β<,1>影響HSC中NF-κ B表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究;4.復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清干預(yù)TGF-β<,1>影響HSC內(nèi)α-SMA表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究;5.復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清干預(yù)TG

5、F-β<,1>影響HSC膠原表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究;結(jié)論:(1)復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清可顯著抑制HSC自分泌TGF-β<,1>.(2)復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清可阻滯HSC于G<,0>、G<,1>期.(3)復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清對外源性TGF-β<,1>抑制HSC中NF-κ B活化和(或)表達(dá),具有增效作用.(4)復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血清可對外源性TGF-β<,1>所致活化的HSC表達(dá)α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型膠原發(fā)揮抑制作用.(5)復(fù)方鱉甲軟肝方藥物血