雞源性大腸埃希菌耐β內(nèi)酰胺類藥物機制的研究.pdf

1、近年來，抗生素的普遍使用使人們在治療一些感染性疾病時面對的抗生素失效問題日趨嚴峻，抗生素耐藥性對人類健康構(gòu)成的威脅已經(jīng)引起了普遍關(guān)注。在全部的抗生素中，包含頭孢菌素類和碳青霉烯類抗生素的β-內(nèi)酰胺類抗生素，因為其最早被發(fā)現(xiàn)并且運用最為廣泛而成為研究的核心。而且大腸埃希菌是能夠引起胃腸道疾病和尿道感染的重要的食物病原菌之一，通常我們會用大量的抗生素來治療大腸桿菌引起的各種感染，這就使得大腸桿菌的耐藥性問題給人類健康提出的挑戰(zhàn)愈加嚴峻。

2、r>　　我們對雞源性大腸埃希菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性及其耐藥性傳播機制展開了研究。通過研究待檢大腸桿菌對14種抗生素的耐藥性統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，158株非重復(fù)雞源性大腸埃希菌基本上都為多重耐藥菌，大部分的大腸桿菌菌株都對10～13種抗生素呈現(xiàn)耐藥狀態(tài)。同時80％的菌株對3種以上的β-內(nèi)酰胺類抗生素表現(xiàn)出耐藥，只有4株菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素表現(xiàn)敏感狀態(tài)，說明從肉雞養(yǎng)殖廠中分離出的耐藥大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性尤其顯著。
　

3、　整合子是在耐藥基因的轉(zhuǎn)移中是尤為重要的一類可移動元件，我們通過檢測發(fā)現(xiàn)，在158株大腸桿菌中，1型整合子和2型整合子的存在率分別為85.44％、18.35％，3型整合子未被檢測到。同時，我們發(fā)覺檢測到了7種不同的基因盒，其中1型整合子可變區(qū)的基因盒為dfrA17-aadA5, dfrA12-orfF-aadA2,dfrA1-aadA1,catB3-arr3,aacA4-cmLA1-variant, dfrA17-aadA5/aacA4

4、-cmLA1-variant,2型整合子對應(yīng)基因盒僅發(fā)現(xiàn)一種，為dfrA1-sat2-aadA1。
　　耐藥決定子的檢測結(jié)果顯示，blaCTX-M和blaTEM耐藥基因存在最為普遍，存在率分別為86.7％、81％。但是blaCTX-M與大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性呈現(xiàn)顯著相關(guān)性。我們又對存在率最高的blaCTX-M進行了分型，其中有77株菌屬于blaCTX-M-1家族，60株菌屬于blaCTX-M-9家族。在blaCTX-

5、M-1家族中70株為blaCTX-M-55亞型，7株為blaCTX-M-123亞型;在blaCTX-M-9家族中，35株為blaCTX-M-65亞型，18株為blaCTX-M-14亞型，7株為blaCTX-M-27亞型。AmpC類耐藥基因blaCMY在5株菌中被發(fā)現(xiàn)并且都為blaCMY-2亞型。雖然不同的blaCTX-M基因的氨基酸序列具有很高的相似度，但是它們對不同的β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥程度顯著不同。blaCTX-M-55主要對AM

6、C、AMP、CAZ、CTX和CPE五種β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，blaCTX-M-14、blaCTX-M-65、blaCTX-M-123主要對AMC、AMP、CTX、CPE四種β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，blaCTX-M-27則主要對AMC抗生素耐藥，對AMP、CTX的耐藥程度介于耐藥與敏感之間。
　　進而我們通過接合轉(zhuǎn)移實驗發(fā)現(xiàn)，可移動元件整合子雖然在耐藥大腸桿菌中普遍存在，但是其并沒有伴隨β-內(nèi)酰胺類耐藥基因的轉(zhuǎn)移而轉(zhuǎn)移到受體菌株。

7、158株大腸桿菌中β-內(nèi)酰胺類耐藥基因接合轉(zhuǎn)移成功率達到53.16％，β內(nèi)酰胺類耐藥基因接合轉(zhuǎn)移成功率顯著高于喹諾酮類耐藥基因和1型、2型整合子。
　　最后，我們發(fā)現(xiàn)檢測到的5株大腸桿菌中的blaCMY-2基因與blaCTX-M基因在對碳青霉烯類抗生素亞胺培南的耐藥性方面存在協(xié)同效應(yīng)。
　　這些結(jié)果表明，肉制品中耐β-內(nèi)酰胺類抗生素的大腸桿菌會對人類健康構(gòu)成嚴重的威脅，整合子在大腸桿菌耐β-內(nèi)酰胺類抗生素的機制中有重要作用，