飼喂兼性厭氧的纖維素分解菌和固氮菌對泌乳奶牛的影響.pdf

1、我們實驗室通過體外發(fā)酵實驗發(fā)現(xiàn)，將分離自奶牛瘤胃液的兼性厭氧纖維素分解菌(L5)和固氮菌(C1)按照4∶1的比例添加，促進了瘤胃發(fā)酵、并提高了纖維素的降解率。我們的假設(shè)是:飼喂L5和C1可能具有促進奶牛瘤胃發(fā)酵的作用，而這種作用將會在奶牛的營養(yǎng)物質(zhì)消化和泌乳性能上得以體現(xiàn)。因此，本文旨在通過奶牛飼喂試驗來驗證我們的假設(shè)，并進一步認識奶牛瘤胃L5和C1。
　　菌種活化和現(xiàn)場試驗所需菌量的確定
　　(1)首先于-20℃冰箱內(nèi)取出

2、兼性厭氧的纖維素分解菌L5和固氮菌C1，在室溫條件下解凍后，再進行菌株的活化處理。兩種菌株的活化為采用液體LB培養(yǎng)基對菌株進行二次復活處理。待培養(yǎng)液內(nèi)的活菌濃度約達到109 CFU·mL-1及以上程度，再通過稀釋涂布平板法測定培養(yǎng)液里實際活菌的數(shù)量。
　　(2)奶牛瘤胃內(nèi)容物容積按56.9 L，瘤胃內(nèi)容物外流速度每小時按總體積的6％，計算出每頭奶牛每1次飼喂所需的活菌總數(shù)為3.368×1011 CFU。兩種菌劑L5和C1是按照4∶

3、1的比例進行混合的，所以其中含L5為2.694×1011 CFU、C1為0.674×1011 CFU。因為最后菌液要與30％的甘油按照1∶1的比例保存在1.5 mL EP管內(nèi)。所以在保證每頭奶牛每1次飼喂L5為2.694×1011 CFU和C1為0.674×1011 CFU的基礎(chǔ)上，要用滅活的LB液體培養(yǎng)基將L5培養(yǎng)液的濃度調(diào)整為5.388×1011 CFU·mL-1和C1培養(yǎng)液的濃度調(diào)整為1.348×1011CFU·mL-1。即每種菌

4、液吸取0.5 mL與0.5 mL30％的甘油混合混勻后，置于冰箱-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?br>　　現(xiàn)場飼喂試驗
　　本試驗采用單因素試驗設(shè)計，將18頭體重（550±50 kg）相近、泌乳天數(shù)（160±20 d）相近和泌乳量（31.72±3.01 kg·d-1）也相近的荷斯坦奶牛隨機分為對照組和試驗組兩個組別。對照組奶牛飼喂奶牛場日常飼糧加上滅活的L5+C1(L5∶C1=4∶1)混合菌劑，試驗組飼喂日常飼糧加上L5+C1混合菌劑。

5、試驗包括16天的預飼期和4天的采樣期，預飼期間觀察并熟悉奶牛采食情況、趴臥和排糞等個體行為;采樣期進行料樣、糞樣、奶樣和血樣樣品的采集。結(jié)果表明:雖然該混合菌劑對日糧NDF、ADF和Ash的表觀消化率沒有顯著影響(P＞0.5)，但它卻可以顯著的提高日糧EE的表觀消化率（P=0.01）;另外混合菌劑有提高日糧CP利用效率的趨勢（P=0.06）。此外，混合菌株對牛奶中乳糖、乳脂、乳蛋白、總固形物和體細胞數(shù)等乳常規(guī)指標以及血清尿素氮、血糖、膽