飼喂兼性厭氧的纖維素分解菌和固氮菌對(duì)泌乳奶牛的影響.pdf

1、我們實(shí)驗(yàn)室通過(guò)體外發(fā)酵實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將分離自奶牛瘤胃液的兼性厭氧纖維素分解菌(L5)和固氮菌(C1)按照4∶1的比例添加，促進(jìn)了瘤胃發(fā)酵、并提高了纖維素的降解率。我們的假設(shè)是:飼喂L5和C1可能具有促進(jìn)奶牛瘤胃發(fā)酵的作用，而這種作用將會(huì)在奶牛的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和泌乳性能上得以體現(xiàn)。因此，本文旨在通過(guò)奶牛飼喂試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證我們的假設(shè)，并進(jìn)一步認(rèn)識(shí)奶牛瘤胃L5和C1。
　　菌種活化和現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)所需菌量的確定
　　(1)首先于-20℃冰箱內(nèi)取出

2、兼性厭氧的纖維素分解菌L5和固氮菌C1，在室溫條件下解凍后，再進(jìn)行菌株的活化處理。兩種菌株的活化為采用液體LB培養(yǎng)基對(duì)菌株進(jìn)行二次復(fù)活處理。待培養(yǎng)液內(nèi)的活菌濃度約達(dá)到109 CFU·mL-1及以上程度，再通過(guò)稀釋涂布平板法測(cè)定培養(yǎng)液里實(shí)際活菌的數(shù)量。
　　(2)奶牛瘤胃內(nèi)容物容積按56.9 L，瘤胃內(nèi)容物外流速度每小時(shí)按總體積的6％，計(jì)算出每頭奶牛每1次飼喂所需的活菌總數(shù)為3.368×1011 CFU。兩種菌劑L5和C1是按照4∶

3、1的比例進(jìn)行混合的，所以其中含L5為2.694×1011 CFU、C1為0.674×1011 CFU。因?yàn)樽詈缶阂c30％的甘油按照1∶1的比例保存在1.5 mL EP管內(nèi)。所以在保證每頭奶牛每1次飼喂L5為2.694×1011 CFU和C1為0.674×1011 CFU的基礎(chǔ)上，要用滅活的LB液體培養(yǎng)基將L5培養(yǎng)液的濃度調(diào)整為5.388×1011 CFU·mL-1和C1培養(yǎng)液的濃度調(diào)整為1.348×1011CFU·mL-1。即每種菌

4、液吸取0.5 mL與0.5 mL30％的甘油混合混勻后，置于冰箱-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?br>　　現(xiàn)場(chǎng)飼喂試驗(yàn)
　　本試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將18頭體重（550±50 kg）相近、泌乳天數(shù)（160±20 d）相近和泌乳量（31.72±3.01 kg·d-1）也相近的荷斯坦奶牛隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組兩個(gè)組別。對(duì)照組奶牛飼喂奶牛場(chǎng)日常飼糧加上滅活的L5+C1(L5∶C1=4∶1)混合菌劑，試驗(yàn)組飼喂日常飼糧加上L5+C1混合菌劑。

5、試驗(yàn)包括16天的預(yù)飼期和4天的采樣期，預(yù)飼期間觀察并熟悉奶牛采食情況、趴臥和排糞等個(gè)體行為;采樣期進(jìn)行料樣、糞樣、奶樣和血樣樣品的采集。結(jié)果表明:雖然該混合菌劑對(duì)日糧NDF、ADF和Ash的表觀消化率沒(méi)有顯著影響(P＞0.5)，但它卻可以顯著的提高日糧EE的表觀消化率（P=0.01）;另外混合菌劑有提高日糧CP利用效率的趨勢(shì)（P=0.06）。此外，混合菌株對(duì)牛奶中乳糖、乳脂、乳蛋白、總固形物和體細(xì)胞數(shù)等乳常規(guī)指標(biāo)以及血清尿素氮、血糖、膽