口腔扁平苔蘚、白斑骨橋蛋白表達(dá)及多態(tài)性分析.pdf

1、口腔白斑(OLK)和口腔扁平苔蘚(OLP)是常見(jiàn)的口腔粘膜病,屬癌前損害.鑒于它們與口腔癌癥的密切關(guān)系,明確其發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的細(xì)胞分子標(biāo)志,并運(yùn)用這些標(biāo)志進(jìn)行遺傳易感性分析、尋找新的簡(jiǎn)便、高效的臨床診斷方法,具有重要的臨床意義. 研究目的： 1、定位和定量口腔白斑和口腔扁平苔蘚患者的骨橋蛋白(OPN)局部組織表達(dá)以及其在體液中的分布.2、確定口腔白斑和口腔扁平苔蘚患者唾液和血清中骨橋蛋白的含量及其相互關(guān)系.3、檢測(cè)口腔扁

2、平苔蘚患者和正常人群的骨橋蛋白前導(dǎo)區(qū)單核苷酸多態(tài)性,并與疾病的發(fā)生進(jìn)行相關(guān)性分析. 研究方法: 1、選擇典型的口腔扁平苔蘚、口腔白斑患者以及正常個(gè)體,分別進(jìn)行骨橋蛋白免疫組化染色,檢測(cè)骨橋蛋白在口腔粘膜中的分布.2、采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)受試個(gè)體唾液和血清中骨橋蛋白,腫瘤壞死因子-α(TNF-α),轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β<,1>(TGF-β1)的含量.3、采用直接測(cè)序法檢測(cè)口腔扁平苔蘚患者和正常人的骨橋蛋白基因

3、啟動(dòng)子區(qū)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游約600bp區(qū)域的SNP位點(diǎn),并進(jìn)行基因型和單體型頻率分析,進(jìn)而分析與疾病的相關(guān)關(guān)系. 研究結(jié)果: 1、口腔扁平苔蘚和口腔白斑患者的粘膜上皮骨橋蛋白表達(dá)明顯增高,正常個(gè)體無(wú)表達(dá) (P<0.05).骨橋蛋白的表達(dá)與口腔白斑的異常增生程度呈正相關(guān) (P<0.05),與口腔扁平苔蘚的臨床類型和異常增生有關(guān)(P<0.05).2、ELISA 檢測(cè)結(jié)果顯示:口腔扁平苔蘚患者唾液和血清 OPN,TNF-α含量均

4、有升高,差異有顯著性 (P<0.05);糜爛型扁平苔蘚的 TGF-β1唾液和血清水平顯著高于網(wǎng)紋型扁平苔蘚,差異有顯著性(P<0.05).三種抗體在唾液和血清中表現(xiàn)出明顯的相關(guān)關(guān)系.口腔白斑患者唾液和血清中OPN水平顯著增加且二者具有顯著相關(guān)關(guān)系.3、對(duì)80例口腔扁平苔蘚患者和100例正常對(duì)照組的OPN基因啟動(dòng)子區(qū)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游長(zhǎng)約600bp的基因進(jìn)行直接測(cè)序,結(jié)果顯示-443T 基因型在口腔扁平苔蘚患者比正常人顯著增高 (P=0.0

5、17),該位點(diǎn)的多態(tài)性可能導(dǎo)致OPN蛋白表達(dá)增加.單體型-66T,-156GG,-443T 頻率在口腔扁平苔蘚患者明顯高于正常對(duì)照組,二者比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P=0.04),該單體型可能與口腔扁平苔蘚發(fā)病易感性有關(guān).4、骨橋蛋白在口腔扁平苔蘚局部病損和唾液、血清中表達(dá)增強(qiáng)可能與骨橋蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性有關(guān). 結(jié)論： 1、骨橋蛋白在口腔白斑和口腔扁平苔蘚患者的口腔粘膜上皮中表達(dá)增強(qiáng). 2、骨橋蛋白在口腔