嗅成鞘細(xì)胞和雪旺細(xì)胞基因表達(dá)差異的研究.pdf

1、本研究以O(shè)ECs和SCs為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用免疫溶解法獲得兩種細(xì)胞的純培養(yǎng)，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）和電鏡技術(shù)觀察OECs的抗原表達(dá)以及形態(tài)特征。利用抑制消減雜交技術(shù)（SSH）篩選兩者的差異表達(dá)基因，從兩者的差異表達(dá)基因中分析與中樞神經(jīng)再生相關(guān)的基因表達(dá)，為進(jìn)一步闡述中樞神經(jīng)再生機(jī)制創(chuàng)造條件。主要結(jié)果如下：1．免疫溶解法獲得OECs和SCs的純培養(yǎng)免疫溶解法純化2h可見懸浮細(xì)胞增多，純化后24h倒置顯微鏡下觀察成纖維細(xì)胞少見，P75N

2、GFr免疫組化顯示OECs純度可達(dá)95％以上；繼續(xù)培養(yǎng)6d后再次進(jìn)行純化可去除大部分新增殖的成纖維細(xì)胞，保持OECs純度在90％以上。2．ICC技術(shù)研究OECs的抗原表達(dá)，電鏡技術(shù)觀察OECs的超微結(jié)構(gòu)特征OECs免疫組化結(jié)果顯示：P75LNGFr（+），GFAP（+），NCAM（+），CDK5(-)。免疫細(xì)胞化學(xué)特征為：P75LNGFr染色均勻分布于整個(gè)細(xì)胞和突起，核區(qū)較為淺淡；GFAP染色較深分布于整個(gè)胞漿和突起；NCAM免疫陽