犬顱腦槍彈傷后腦組織中熱休克蛋白70、c-myc、bcl-2和細胞凋亡表達及意義的實驗研究.pdf

1、顱腦火器傷具有死亡率﹑致殘率高,救治難度大等特點,是戰(zhàn)創(chuàng)傷研究的重點之一。顱腦火器傷的死亡率自二戰(zhàn)以來一直保持在30％-40％，在火器傷致死的人數中，顱腦傷幾乎占50％。由于現代戰(zhàn)爭的不斷發(fā)生，所以人們對顱腦火器傷的研究應更加深入，以降低其死亡率，提高治愈率。本實驗采用低速德國小口徑步槍射擊犬頭顱，建立犬腦貫通傷(penetrating cranioc-erebral injury，PCI)和腦切線傷（tangent brain inj

2、ury，TBI）模型，研究犬顱腦火器傷后熱休克蛋白70, c-myc,Bcl-2 以及細胞凋亡的表達和調控機制。探討其在顱腦火器傷中的作用,為臨床救治提供重要理論依據。 一、腦槍彈傷模型建立及相關生理、病理指標觀察 目的：建立犬顱腦槍彈傷模型，檢驗該模型用于顱腦槍彈傷研究的可行性。 方法：雜種犬14 只，采用低速德國小口徑步槍子彈致TBI 組和PCI 組。觀察實驗犬傷后相關生理與病理指標的變化。 結果：T

3、BI 組和PCI 組實驗犬傷后存活時間較長。兩組均在傷后數分鐘至1h 內出現明顯的心率減慢、血壓下降、頸動脈血流量減少、呼吸暫?；驕p慢、顱內壓(intracranial pressure，ICP)逐漸升高。兩組挫傷區(qū)病理表現為腦血管擴張、充血、血管周圍環(huán)形出血、神經細胞輕度缺血、壞死及腦水腫(brain edema，BE)。 結論：上述模型均具有彈道傷恒定、重復性好、傷后動物存活時間較長等特點。 二、犬顱腦槍彈傷后腦組織

4、中熱休克蛋白70 和c-myc 的表達 目的：研究犬槍彈傷后腦組織中熱休克蛋白70（Heat shock protein70，HSP70）和快反應蛋白c-myc 的變化規(guī)律。 方法：24 只雜種犬，隨機分為對照組，損傷組。采用德國小口徑步槍子彈致犬顱腦額葉切線傷（tangent braininjury， TBI）。用免疫組織化學方法檢測傷后30min、2h、6h、12h 和24h 各不同時期彈道挫傷區(qū)、震蕩區(qū)、海馬及腦干

5、神經元中HSP70 和c-myc 蛋白的表達。 結果：對照組腦神經元中HSP70 和c-myc 蛋白表達弱，槍彈傷組挫傷區(qū)、震蕩區(qū)、海馬及腦干神經元中HSP70 蛋白2h 開始增加( P<0.05)，6h 時明顯增加，12h 達高峰( P<0.01)，24h 開始下降。C-myc 傷后30min 開始增加( P<0.05)，2h 達高峰( P<0.01)，6h 開始下降，24h 同對照組。且2 種蛋白距傷道越近，表達越明顯。

6、 結論：HSP70 和c-myc 蛋白在彈道挫傷區(qū)、震蕩區(qū)、海馬及腦干神經元均有表達，兩者在腦組織中表達分布范圍基本一致，但c-myc 先于HSP70 表達。 三、犬顱腦槍彈傷后神經細胞凋亡及bcl-2 的表達 目的：研究犬顱腦槍彈傷后神經細胞凋亡機制及bcl-2 的變化規(guī)律。 方法：建立犬顱腦槍彈傷模型，制備不同時期、不同部位腦組織切片。采用末端脫氧核苷酸轉移酶介導的生物素脫氧尿嘧啶核苷酸缺口末端標記法(T

7、UNEL)檢測腦神經細胞凋亡以及用免疫組織化學方法檢測bcl-2 的動態(tài)變化。 結果：對照組犬偶見神經細胞凋亡，神經細胞中有微弱bcl-2 的表達，槍彈傷后凋亡神經細胞及bcl-2 于2h 開始增加，24h 達高峰，48h 開始下降。不同區(qū)域表達不完全一致。各觀測點神經細胞與bcl-2 表達呈負相關。 結論：犬腦槍彈傷后神經細胞bcl-2 的表達增強，在不同時期、不同部位具有時空規(guī)律性。神經細胞的凋亡與凋亡保護基因的調節(jié)