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1、以1日齡SPF雛雞為研究對(duì)象,應(yīng)用TUNEL、HE、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫組織化學(xué)及間接ELISA等方法,通過(guò)凋亡細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞核漿比、Bcl-2和C-myc基因表達(dá)等相關(guān)指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化的檢測(cè),較全面系統(tǒng)的研究了REV感染對(duì)SPF雛雞免疫器官(胸腺、法氏囊和脾臟)中上述被檢指標(biāo)變化的影響,旨在為RE發(fā)生機(jī)制和其防治提供重要的實(shí)驗(yàn)參考依據(jù)。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):
(1)REV感染1日齡SPF雛雞后,其免疫器官中凋亡細(xì)胞數(shù)量均不同程度高于
2、對(duì)照雛雞,且法氏囊中細(xì)胞凋亡現(xiàn)象最為明顯。其中,REV感染后21~28 d,胸腺與法氏囊中凋亡細(xì)胞數(shù)量均明顯(P<0.05或P<0.01)高于對(duì)照雛雞。42 d時(shí),法氏囊中凋亡細(xì)胞數(shù)量依然顯著(P<0.05)高于對(duì)照雛雞。REV感染雛雞后,其免疫器官中細(xì)胞核漿比不同程度小于對(duì)照雛雞。其中,法氏囊中細(xì)胞核漿比在病毒感染后21~28 d顯著(P<0.05)小于對(duì)照雛雞,而胸腺和脾臟中細(xì)胞核漿比盡管低于對(duì)照雛雞,但未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05
3、)。
(2)REV感染1日齡SPF雛雞后,其免疫器官中Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量、Bcl-2 mRNA表達(dá)及其蛋白含量均不同程度的高于對(duì)照雛雞。其中,病毒感染后21d,胸腺與法氏囊中Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量顯著(P<0.05)高于對(duì)照雛雞,28 d時(shí),胸腺和脾臟中Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量與對(duì)照雛雞相比明顯增多(P<0.05),而法氏囊中Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量極顯著(P<0.01)高于對(duì)照雛雞;胸腺、法氏囊和脾臟中Bcl-2 mRNA表
4、達(dá)及其蛋白含量在病毒感染后21~28 d均明顯(P<0.05或P<0.01)高于對(duì)照雛雞。
(3)REV感染1日齡SPF雛雞后,其免疫器官中C-myc陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量、C-myc mRNA表達(dá)及其蛋白含量均不同程度高于對(duì)照雛雞。其中,胸腺、法氏囊中C-myc陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量分別于病毒感染后21 d、21~28 d顯著(P<0.05)高于對(duì)照雛雞;胸腺中C-myc蛋白含量,在病毒感染后21~28 d顯著(P<0.05)高于對(duì)照雛雞,脾臟
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