肺細胞系中熱休克蛋白70b39;的表達特征及意義

1、華中科技大學碩士學位論文肺細胞系中熱休克蛋白70B'的表達特征及意義姓名：劉曉勇申請學位級別：碩士專業(yè)：勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學指導教師：鄔堂春20080501華 中 科 技 大 學 碩 士 學 位 論 文 華 中 科 技 大 學 碩 士 學 位 論 文 斷中可作為一項有意義的參考指標。Hsp70B’、Hsp72 作為 Hsp70 家族中誘導性、且具有重要生物學意義的兩種蛋白，Hsp72 在細胞和組織中的保護作用已經非常明確，對于

2、 Hsp70B’這個僅在高溫作用下的癌細胞具有中發(fā)現(xiàn)的 Hsp70 家族的成員， 其獨特的熱誘導性提示其可能具有某些獨特的生物學功能。因此，本研究為探討 Hsp70B’的可能功能和在肺癌中的作用，對 Hsp70B’在肺腺癌細胞 A549 中高溫應激后的動態(tài)表達及與細胞活性、Hsp72 的表達進行比較分析，檢測了 Hsp70B’在熱應激作用下的A549 細胞中的動態(tài)表達特征；并通過分析 A549 細胞、16HBE 細胞和 BPDE 轉化的

3、16HBE 細胞在高溫、紫外、苯并(a)芘作用下 Hsp70B’的表達水平的變化及與 Hsp72的表達差異，發(fā)現(xiàn)了 Hsp70B’僅在高溫作用下的癌細胞中或者在受應激的惡性轉化細胞中表達的特性。 第一部分 第一部分 熱休克蛋白 熱休克蛋白 70B’在熱應激作用下的 在熱應激作用下的 A549 細胞中的動態(tài)表達 細胞中的動態(tài)表達 Hsp70B’作為 Hsp70 家族的一員，呈現(xiàn)出獨特的熱誘導性，僅在經過熱應激后的子宮癌（Hela）細胞、結

4、腸癌細胞中檢測到 Hsp70B’蛋白。本部分通過在高溫應激作用下的肺腺癌 A549 細胞中檢測 Hsp70B’、Hsp72 的表達水平，實驗結果顯示，正常的 A549 細胞中沒有 Hsp70B’的表達，隨溫度升高呈現(xiàn)先升高后逐步降低的趨勢，細胞在 42℃應激 60min 后 Hsp70B’的表達量上升至最高。劇烈熱應激（如 45℃）時，細胞活性降低， HSPs 在細胞中不能充分表達也不能很好發(fā)揮蛋白保護作用。 Hsp70B’在 42℃溫

5、和熱應激 20min 后的 A549 細胞中開始表達， 60min 時升高至最高， 至 120min表達量已降低至最高水平的 60％。A549 細胞經 42℃熱應激 1h 后恢復正常生長條件6h，Hsp70B’的表達出現(xiàn)最高峰，但維持時間比較短，恢復 12h 后表達量迅速下降，24h 后僅有微弱條帶。這種短暫表達表明 Hsp70B’的表達可能與細胞的熱耐受后早期恢復有關。說明 Hsp70B’作為細胞熱應激反應的產物之一，參與熱應激反應，