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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文肺細(xì)胞系中熱休克蛋白70B'的表達(dá)特征及意義姓名:劉曉勇申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師:鄔堂春20080501華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 斷中可作為一項有意義的參考指標(biāo)。Hsp70B’、Hsp72 作為 Hsp70 家族中誘導(dǎo)性、且具有重要生物學(xué)意義的兩種蛋白,Hsp72 在細(xì)胞和組織中的保護(hù)作用已經(jīng)非常明確,對于
2、 Hsp70B’這個僅在高溫作用下的癌細(xì)胞具有中發(fā)現(xiàn)的 Hsp70 家族的成員, 其獨特的熱誘導(dǎo)性提示其可能具有某些獨特的生物學(xué)功能。因此,本研究為探討 Hsp70B’的可能功能和在肺癌中的作用,對 Hsp70B’在肺腺癌細(xì)胞 A549 中高溫應(yīng)激后的動態(tài)表達(dá)及與細(xì)胞活性、Hsp72 的表達(dá)進(jìn)行比較分析,檢測了 Hsp70B’在熱應(yīng)激作用下的A549 細(xì)胞中的動態(tài)表達(dá)特征;并通過分析 A549 細(xì)胞、16HBE 細(xì)胞和 BPDE 轉(zhuǎn)化的
3、16HBE 細(xì)胞在高溫、紫外、苯并(a)芘作用下 Hsp70B’的表達(dá)水平的變化及與 Hsp72的表達(dá)差異,發(fā)現(xiàn)了 Hsp70B’僅在高溫作用下的癌細(xì)胞中或者在受應(yīng)激的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞中表達(dá)的特性。 第一部分 第一部分 熱休克蛋白 熱休克蛋白 70B’在熱應(yīng)激作用下的 在熱應(yīng)激作用下的 A549 細(xì)胞中的動態(tài)表達(dá) 細(xì)胞中的動態(tài)表達(dá) Hsp70B’作為 Hsp70 家族的一員,呈現(xiàn)出獨特的熱誘導(dǎo)性,僅在經(jīng)過熱應(yīng)激后的子宮癌(Hela)細(xì)胞、結(jié)
4、腸癌細(xì)胞中檢測到 Hsp70B’蛋白。本部分通過在高溫應(yīng)激作用下的肺腺癌 A549 細(xì)胞中檢測 Hsp70B’、Hsp72 的表達(dá)水平,實驗結(jié)果顯示,正常的 A549 細(xì)胞中沒有 Hsp70B’的表達(dá),隨溫度升高呈現(xiàn)先升高后逐步降低的趨勢,細(xì)胞在 42℃應(yīng)激 60min 后 Hsp70B’的表達(dá)量上升至最高。劇烈熱應(yīng)激(如 45℃)時,細(xì)胞活性降低, HSPs 在細(xì)胞中不能充分表達(dá)也不能很好發(fā)揮蛋白保護(hù)作用。 Hsp70B’在 42℃溫
5、和熱應(yīng)激 20min 后的 A549 細(xì)胞中開始表達(dá), 60min 時升高至最高, 至 120min表達(dá)量已降低至最高水平的 60%。A549 細(xì)胞經(jīng) 42℃熱應(yīng)激 1h 后恢復(fù)正常生長條件6h,Hsp70B’的表達(dá)出現(xiàn)最高峰,但維持時間比較短,恢復(fù) 12h 后表達(dá)量迅速下降,24h 后僅有微弱條帶。這種短暫表達(dá)表明 Hsp70B’的表達(dá)可能與細(xì)胞的熱耐受后早期恢復(fù)有關(guān)。說明 Hsp70B’作為細(xì)胞熱應(yīng)激反應(yīng)的產(chǎn)物之一,參與熱應(yīng)激反應(yīng),
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