促紅細胞生成素及其受體在蕈樣肉芽腫患者皮損中的表達.pdf

1、促紅細胞生成素(Epo)的基本功能是促進紅系祖細胞增生和分化，Epo與其受體(EpoR)結(jié)合發(fā)揮作用。近些年的研究發(fā)現(xiàn)Ep0R除在紅系祖細胞表達外，還可在多種非造血組織中表達，這表明Epo的作用并不局限于造血組織，因此Epo是很可能一種作用廣泛和多效的細胞因子。近來的研究發(fā)現(xiàn)Epo和EpoR在多種類型的惡性腫瘤細胞及其來源的細胞系表達，并發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤內(nèi)存在的自分泌或旁分泌Epo-EpoR信號與惡性腫瘤的生物學行為改變有關(guān)，如促進腫瘤細胞

2、增殖、抑制腫瘤細胞凋亡和降低腫瘤細胞對放化療的敏感性。 目的: 目前對Epo和EpoR在蕈樣肉芽腫(MF)患者皮損中淋巴細胞的表達國內(nèi)外尚未有研究報道，本文擬采用免疫組化方法(S—P法)對MF患者皮損中淋巴細胞Epo及EpoR的表達情況進行初步研究。 方法: 一、臨床標本的選擇 選取MF和炎癥性皮膚病(ID)病例活檢標本，MF組16例，包括早期(斑片或斑塊期)12例和腫瘤期4例；ID組15例，包括

3、銀屑病6例、濕疹4例和扁平苔蘚5例。所有入選病例均由3位皮膚病理醫(yī)生閱讀HE染色切片后明確診斷。入選患者均無明顯心、腦、肝及腎等臟器病變和外周血異常，兩組病例在年齡和性別構(gòu)成比方面具有可比性。 二、免疫組化方法(S—P法) 將入選標本蠟塊切成5μm厚切片，經(jīng)過二甲苯和梯度酒精脫蠟后在PH值為6.0的檸檬酸緩沖液中進行抗原修復(fù)，然后用3％H<,2>O<,2>溶液孵育以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性，準備染色。主要試劑為：Epo抗

4、體、EpoR抗體、免疫組化染色試劑盒和顯色劑。DAB按照用法指導(dǎo)操作。免疫組化染色后用蘇木素復(fù)染，塑膠封片待觀察。 三、免疫組化染色對照 以侵襲性惡性黑素瘤標本作為陽性對照，以PBS代替Epo和EpoR抗體作為陰性對照。 四、結(jié)果判定使用共覽顯微鏡(Olympus BX50)觀察HE切片及免疫組化染色結(jié)果 1、判定標準 Epo染色標本，細胞胞漿表達為陽性；EpoR染色標本，細胞胞漿或胞膜表達均為陽

5、性。 2、評分標準 采用盲法，由3位病理醫(yī)生對2組免疫組化染色切片進行半定量評分。淋巴細胞無著色記為0分，胞漿局部細小顆粒著色視為輕度表達并記為1分，胞漿中等細小顆粒著色或局部粗大顆粒著色視為中度表達并記為2分，胞漿彌漫性細小顆粒著色或明顯粗大顆粒著色視為強表達并記為3分。每個視野(×100)的淋巴細胞染色積分=1×輕度表達％+2×中度表達％+3×強表達％，每張切片隨機選取3個視野，取其平均值為其積分。 五、統(tǒng)計