高脂飲食下血漿TNF-α、IL-6和FFA變化特點(diǎn)的研究.pdf

1、研究背景：對(duì)于2型糖尿病(type2diabetesmellitus，T2DM)發(fā)病因素的研究不斷有新的進(jìn)展，目前認(rèn)為胰島素抵抗是T2DM發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，但產(chǎn)生胰島素抵抗的原因以及在胰島素抵抗的基礎(chǔ)上如何發(fā)展為T(mén)2DM仍不十分清楚?！爸拘浴奔僬f(shuō)認(rèn)為長(zhǎng)期的高脂血癥可以影響β細(xì)胞功能，并進(jìn)一步損害葡萄糖內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，最終導(dǎo)致T2DM的發(fā)生，該假說(shuō)強(qiáng)調(diào)了脂代謝紊亂在T2DM發(fā)病中的重要性。近來(lái)又有假說(shuō)認(rèn)為T(mén)2DM可能是一種“自然免疫和低強(qiáng)度

2、的炎癥性疾病”，這方面的證據(jù)源自早期的臨床流行病學(xué)調(diào)查研究，起初僅是觀察到新發(fā)的T2DM患者有明顯的白細(xì)胞計(jì)數(shù)增加，后來(lái)又發(fā)現(xiàn)在肥胖或T2DM患者血漿中γ球蛋白、腫瘤壞死因子—α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、白細(xì)胞介素—6(interleukin-6，IL-6)等明顯增高。而一項(xiàng)以肥胖患者為對(duì)象的前瞻性研究證明C反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein，CRP)和IL-6是T2DM發(fā)病的重要預(yù)報(bào)因子。除

3、了流行病學(xué)證據(jù)外，基礎(chǔ)和臨床實(shí)驗(yàn)研究中也發(fā)現(xiàn)了新的證據(jù)：給予肥胖的嚙齒類(lèi)動(dòng)物大劑量水楊酸治療后可以逆轉(zhuǎn)高血糖，高胰島素血癥和血脂異常；而將離體培養(yǎng)的脂肪細(xì)胞暴露在大劑量的炎癥介質(zhì)中，可以很快觀察到細(xì)胞內(nèi)胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙。因此炎癥被認(rèn)為是連接肥胖、胰島素抵抗與T2DM的重要環(huán)節(jié)。在對(duì)炎癥的進(jìn)一步研究中，逐漸認(rèn)識(shí)到脂肪組織具有重要的內(nèi)分泌功能，如TNF-α，IL-6等促炎性細(xì)胞因子在脂肪組織內(nèi)同樣有大量的表達(dá)和分泌，尤其是體循環(huán)中約三分之

4、一的IL-6均來(lái)自于脂肪組織，因此這部分細(xì)胞因子又被稱(chēng)為脂肪細(xì)胞因子(adipocytokines)?？傊?，不論是“炎癥”假說(shuō)還是“脂毒性”假說(shuō)，均離不開(kāi)對(duì)脂肪組織功能的研究，脂代謝異常和脂肪內(nèi)分泌紊亂在肥胖、胰島素抵抗和2型糖尿病的發(fā)病過(guò)程中扮演著非常重要的角色。 對(duì)脂代謝和脂肪細(xì)胞因子的研究中，血漿游離脂肪酸(freefattyacids，F(xiàn)FA)，TNF-α和IL-6的濃度升高被認(rèn)為與胰島素抵抗或T2DM的發(fā)病密切相關(guān)，但

5、這方面的多數(shù)研究是在急性條件下應(yīng)用藥理劑量的FFA、TNF-α或IL-6對(duì)受試對(duì)象作用的結(jié)果，而對(duì)胰島素抵抗或2型糖尿病患者血漿FFA、TNF-α和IL-6濃度在發(fā)病前后如何變化的研究卻很少，本研究擬動(dòng)態(tài)觀察大鼠胰島素抵抗發(fā)生前后血漿FFA、TNF-α和IL-6的濃度變化特征，以期闡明血漿FFA、TNF-α和IL-6與胰島素抵抗之間可能的因果關(guān)系。 目的以高脂飲食飼養(yǎng)大鼠，在誘導(dǎo)大鼠胰島素抵抗發(fā)生的過(guò)程中，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血漿中TNF-

6、α、IL-6和FFA的濃度變化情況，研究其與大鼠胰島素抵抗之間可能存在的因果關(guān)系。 方法以高脂飼料和普通飼料分別喂養(yǎng)2組大鼠，共28天。飼養(yǎng)過(guò)程中不限制大鼠飲食，于每日上午8時(shí)稱(chēng)取各籠飼料消耗量，每7天經(jīng)禁食12小時(shí)后測(cè)量體重一次，尾部末梢采取血樣約1.0ml；尾套法測(cè)量血壓，采血后立即進(jìn)行血糖測(cè)定，剩余血樣經(jīng)離心后，將上清液保存于—70℃冰箱，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行統(tǒng)一檢測(cè)，血漿胰島素、TNF-α、IL-6均采用液相競(jìng)爭(zhēng)放射免疫法檢測(cè)

7、，F(xiàn)FA以銅顯色法進(jìn)行檢測(cè)。 主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.血糖、血漿胰島素、胰島素抵抗指數(shù)變化特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)期間各組動(dòng)物空腹血糖均無(wú)明顯變化，組內(nèi)和組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；高脂飼料組空腹血漿胰島素水平在第3周開(kāi)始明顯升高與普通飼料組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，胰島素抵抗指數(shù)亦在第3周開(kāi)始與普通飼料組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，而普通飼料組無(wú)明顯變化。 2.血漿FFA的濃度變化特點(diǎn)高脂飼料組空腹血漿FFA濃度在第3周開(kāi)始與普通飼

8、料組比較有升高(P＜0.01)；以高脂飼料組每周的空腹血漿FFA和胰島素濃度進(jìn)行線(xiàn)性相關(guān)分析顯示二者呈明顯的正相關(guān)關(guān)系(r=0.53P＜0.01)，而空腹血漿FFA濃度和胰島素抵抗指數(shù)之間亦呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.34P＜0.01)。 3.血漿IL-6和TNF-α的濃度變化特點(diǎn)在高脂飼料組和普通飼料組中空腹血漿IL-6濃度均從第3周開(kāi)始明顯有升高，組內(nèi)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05，普通組；P＜0.01，高脂組)，但組間比較升高幅

9、度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而對(duì)各組大鼠每周的IL-6濃度與體重線(xiàn)性相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)二者之間呈正相關(guān)關(guān)系(普通組r=0.48P＜0.05和高脂組r=0.45P＜0.01)；而高脂飼料和普通飼料組大鼠空腹血漿TNF-α濃度在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)明顯變化，組間及組內(nèi)比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異； 結(jié)論：1.高脂飲食下血漿FFA與空腹胰島素濃度升高關(guān)系密切，與胰島素抵抗指數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系，但本實(shí)驗(yàn)中三者在同一時(shí)期升高，因此尚難分清其間的因果關(guān)系。 2.高脂飲食大