TNF-α和IL-6基因多態(tài)性與COPD易感性的關(guān)系研究.pdf

1、[目的]慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)病是多基因遺傳、環(huán)境等因素共同作用的結(jié)果。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)是近年研究認(rèn)為可能與COPD發(fā)病相關(guān)的細胞因子。本實驗應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性法(PCR-RFLP)對TNF-a基因啟動子+489位點及IL-6基因啟動子-572位點進行研究，探討這兩種基因各位點的基因多態(tài)性是否與山西省汾陽地區(qū)漢族人群COPD的易感性相關(guān)。
　　 [材料與方

2、法]選用病例-對照的研究方法，收集來自山西省汾陽地區(qū)漢族人群的60例COPD患者和62例健康對照者的外周靜脈血3ml，用全血基因組DNA提取試劑盒提取DNA，應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對兩組研究對象的TNF-a基因啟動子+489位點及IL-6基因啟動子-572位點的特異性片段進行擴增，再應(yīng)用限制性片段長度多態(tài)性法對擴增的特異性片段用TaiⅠ內(nèi)切酶、MbiⅠ內(nèi)切酶分別進行酶切，酶切產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳的方法進行檢測，分析其基因型及等位基因頻率的分

3、布。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，年齡、肺功能比較采用兩組獨立樣本t檢驗，性別、吸煙史及吸煙指數(shù)構(gòu)成比、基因型及等位基因頻率比較采用x2檢驗或Fisher精確概率法，相對危險度用比值比(OR值)和95％可信區(qū)間(95％CI)表示，用相加模型判斷吸煙和各基因多態(tài)性之間的交互作用。
　　 [結(jié)果]1.兩組研究對象的性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，F(xiàn)EV1/Pre％、FEV1/FVC差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜O

4、.05)，在性別、年齡方面匹配。
　　 2.兩組研究對象的吸煙史構(gòu)成、吸煙指數(shù)構(gòu)成比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且隨吸煙指數(shù)增大，OR值增大。
　　 3.TNF-a+489位點PCR擴增后目的片段的長度為551bp，酶切后有3種基因型，G/G基因型(111bp、159bp、281bp3條帶)，G/A基因型(111bp、159bp、281bp、392bp4條帶)，A/A基因型(159bp、392bp2條帶)。IL-

5、6-572位點PCR擴增后目的片段的長度為163bp，酶切有3種基因型，C/C基因型(163bp1條帶)，C/G基因型(163bp、101bp、62bp3條帶)，G/G基因型(101bp、62bp2條帶)。
　　 4.兩組研究對象各基因型頻率分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，研究對象具有代表性。
　　 5.兩組研究對象TNF-a基因+489位點基因型頻率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但G/G基因型

6、與非G/G基因型及等位基因頻率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，相對危險度比較提示，與非A等位基因攜帶者相比，A等位基因攜帶者患病的危險性增大(OR=2.280,95％CI=1.019～5.101)。兩組研究對象IL-6基因-572位點基因型頻率、等位基因頻率及C/C基因型與非C/C基因型頻率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 6.對照組IL-6基因-572位點基因型頻率及等位基因頻率與國內(nèi)的其他研究、日本相比

7、差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，與西班牙、美國相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 7.病例組中按照吸煙情況分析，吸煙組與非吸煙組的TNF-a+489A等位基因頻率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 8.病例組中按照肺功能分為4級，不同肺功能人群的TNF-α+489基因型頻率和等位基因頻率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 9.與不吸煙且G/G基因型者相比，吸煙且非G/G基因型者

8、患病的危險性明顯增大，(OR=6.500，95％CI=1.467～28.804)，交互作用指數(shù)5＞1，吸煙和TNF-a+489基因多態(tài)性對COPD的發(fā)生存在相加模型的正交互作用。
　　 [結(jié)論]
　　 1.TNF-a基因啟動子+489位點基因多態(tài)性可能與山西省汾陽地區(qū)漢族人群COPD的易感性相關(guān)，A等位基因可能是COPD的易感基因。
　　 2.吸煙和TNF-a基因啟動子+489位點基因多態(tài)性對COPD的發(fā)生可能存