有氧運動干預高脂膳食誘導大鼠生殖細胞凋亡與TNF-α、IL-6的相關性研究.pdf

1、實驗目的:
　　探討高脂膳食誘導雄性SD大鼠睪丸生殖細胞凋亡與炎癥因子TNF-α、IL-6的關系，并初步揭示有氧運動對雄性高脂膳食大鼠睪丸生殖細胞凋亡與炎癥反應的干預作用。
　　實驗方法:
　　將48只健康的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為4組:正常對照組(C)、高脂膳食組(HF)、正常運動組(CE)、高脂運動組(HE)，每組12只;C組和CE組給予普通飼料喂養(yǎng)，HF組和HE組給予高脂、高熱量飼料喂

2、養(yǎng)。實驗結(jié)束后，各組大鼠數(shù)量為:C組8只，HF組11只，CE組10只，HE組11只。運動方案為10周60min無負重游泳運動，每周6天。實驗結(jié)束后檢測大鼠血清中甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL);測量大鼠體重、體長、脂肪重量，計算Lee's指數(shù)及脂體比;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素6（IL-6）;RT-PCR檢測大鼠睪周脂中TNF-α、IL-6以及

3、睪丸中TNFR、IL-6R mRNA的表達量;HE染色觀察睪丸組織形態(tài)學的變化;原位缺口末端標記法(TUNEL)檢測大鼠睪丸組織細胞凋亡情況。
　　實驗結(jié)果:
　　1.10周后CE組與C組相比，體重呈極顯著降低，Lee's指數(shù)、TG顯著降低，HDL顯著升高，睪周脂、脂體比、TC、LDL無顯著性差異。HF組與C組相比，體重、睪周脂、脂體比、TC、LDL均呈極顯著升高，TG、HDL、Lee's指數(shù)均無明顯差異。HE組與HF組相比

4、，體重、睪周脂、脂體比、TG、TC、LDL均極顯著降低，Lee's指數(shù)、HDL無顯著性差異。
　　2.CE組與C組相比，大鼠血清中TNF-α、IL-6水平呈顯著降低。HF組與C組相比，大鼠血清中TNF-α水平顯著升高，IL-6水平有所升高，但無顯著性差異。HE組與HF組相比，TNF-α、IL-6水平均呈極顯著降低。通過單因素方差分析可知，高脂膳食可引起大鼠血清中TNF-α與IL-6水平增加，而有氧運動可降低血清TNF-α與IL-6

5、水平。
　　3.經(jīng)HE染色光鏡下觀察大鼠睪丸組織形態(tài)，發(fā)現(xiàn)C組生精小管內(nèi)各級生精細胞發(fā)育正常，排列整齊，官腔未見明顯狹窄及擴張，管腔內(nèi)可見大量成熟精子。CE組睪丸生精小管內(nèi)間隙變寬，成熟精子分布均勻。HF組睪丸組織生精小管管壁變薄，生精細胞數(shù)量明顯減少且排列紊亂，成熟精子數(shù)量顯著減少，各級生精細胞出現(xiàn)脫落現(xiàn)象，個別大鼠生精細胞與基底膜之間出現(xiàn)脫離。HE組生精小管內(nèi)各級生精細胞基本發(fā)育正常，偶可見細胞脫落現(xiàn)象，生精小管間可見疏松的間

6、質(zhì)組織。
　　4.CE組與C組相比，大鼠睪周脂中TNF-α、IL-6的mRNA水平有所升高，但無顯著性差異;HE組與HF組相比，睪周脂中TNF-α、IL-6 mRNA水平顯著降低。通過單因素方差分析可知，高脂膳食使大鼠睪周脂中TNF-α、IL-6 mRNA水平升高，引起睪周脂出現(xiàn)炎癥反應，而有氧運動可以適當降低TNF-α、IL-6 mRNA水平，減輕炎癥的影響。5.CE組與C組相比，大鼠睪丸組織中TNFR、IL-6R的mRNA水平

7、有所升高，但無顯著性差異;HE組與HF組相比，睪丸組織中TNFR、IL-6R mRNA水平顯著降低。通過單因素方差分析可知，高脂膳食使大鼠睪丸組織中TNFR、1L-6R mRNA水平顯著升高，引起睪丸組織出現(xiàn)炎癥反應，而有氧運動可以適當降低TNFR、IL-6R mRNA水平，減輕炎癥的影響。
　　6.大鼠睪丸組織中凋亡細胞情況:與C組相比，CE組睪丸組織中生殖細胞凋亡率有所升高，但無明顯差異，HF組和HE組睪丸組織中生殖細胞凋亡率

8、極顯著升高。HE組與HF組相比，睪丸組織中生殖細胞凋亡率極顯著降低。通過單因素方差分析可知，高脂膳食可能引起睪丸組織的炎癥反應，從而導致睪丸組織中生殖細胞凋亡增加，而有氧運動可以緩解這一情況。
　　實驗結(jié)論:
　　1.高脂膳食可引發(fā)SD雄性大鼠脂代謝紊亂，血清中TNF-α、IL-6蛋白表達及睪脂中的mRNA水平與Lee's指數(shù)及血脂四項具有相關性，而有氧運動能改善這一情況。
　　2.高脂膳食可以使SD雄性大鼠睪丸組織結(jié)