1，25（OH）-,2-VD-,3-、降鈣素對小鼠成骨細胞和軟骨細胞增殖及OPG-RANKL-RANK表達影響的實驗研究.pdf

1、目的:1,25(OH)<,2>VD<,3>和降鈣素對小鼠成骨細胞和軟骨細胞增殖及OPG/RANKL表達的影響以及大鼠股骨干骺端中RANK表達的實驗研究.方法:取出生24小時內的小鼠30只,無菌的條件下取出關節(jié)軟骨和顱骨,應用酶消化法進行軟骨細胞和成骨細胞的培養(yǎng),在培養(yǎng)軟骨細胞和成骨細胞的培養(yǎng)液中加入不同濃度的1,25(OH)<,2>VD<,3>或者降鈣素,首先應用MTT法檢測這兩種藥物對成骨細胞和軟骨細胞增殖的影響,然后應用RT-PCR

2、法檢測其對OPG/RANKL mRNA的表達及ELISA法檢測OPG蛋白分泌的影響.應用免疫組織化學染色的方法檢測不同鼠齡的去勢大鼠股骨干骺端中RANK的表達.結果:1,25(OH)<,2>VD<,3>可以抑制成骨細胞和軟骨細胞的增殖.降鈣素能促進成骨細胞和軟骨細胞的增殖.1,25(OH)<,2>VD<,3>能抑制成骨細胞和軟骨細胞中OPG mRNA的表達及增強RANKL mRNA的表達,并能促進成骨細胞中OPG蛋白的分泌;降鈣素能增強

3、成骨細胞中OPG mRNA的表達同時抑制成骨細胞中RANKL mRNA的表達,并能促進OPG蛋白的分泌,在軟骨細胞中降鈣素對OPG mRNA的表達沒有明顯的影響但能抑制RANKL mRNA的表達.在老年雌性大鼠的股骨干骺端皮質骨外膜中RANK的表達較12周鼠齡的股骨干骺端中RANK的表達減弱,骨內膜中RANK的表達在不同的鼠齡中變化不明顯.在去勢大鼠的小梁骨中RANK的表達較假手術組大鼠明顯增強.結論:1,25(OH)<,2>VD<,3