乳腺炎發(fā)病機制及黃芩苷治療作用研究.pdf

1、本試驗用乳腺炎患牛奶樣中分離的金黃色葡萄球菌制成細菌懸液，通過乳頭管將細菌懸液注入泌乳母鼠乳池內(nèi)，誘發(fā)小鼠乳腺炎。在建立小鼠乳腺炎模型的基礎(chǔ)上，通過細菌計數(shù)，組織學(xué)，組織化學(xué)，免疫組化染色技術(shù)及酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)等方法研究了乳腺炎模型中金黃色葡萄球菌感染誘發(fā)的乳腺免疫反應(yīng)，及中藥單體成分黃芩苷對乳腺炎的治療效果和作用機制。 研究結(jié)果顯示：模型組母鼠乳腺內(nèi)金黃色葡萄球菌數(shù)在攻菌后24h達到峰值，48h時有所下降，72h

2、時又有所增多；模型組乳腺組織在攻菌后12h出現(xiàn)明顯病變，并隨感染時間延長有加重趨勢；模型組脫顆粒肥大細胞數(shù)在攻菌后6h極顯著多于生理鹽水組(分別為0.960±0.735和0.200±0.408個/視野，40倍物鏡下，下同，P＜0.01)；模型組肥大細胞數(shù)在攻菌后12h顯著多于生理鹽水組(分別為3.320±1.069和2.080±0.954個/視野，P＜0.05)。脫顆粒肥大細胞數(shù)和肥大細胞總數(shù)隨感染時間延長呈增多趨勢；模型組樹突狀細胞數(shù)

3、隨感染時間延長逐漸增多，與生理鹽水組相比，在攻菌后48h顯著增多(P＜0.05)；模型組CD4+T細胞數(shù)隨攻菌時間延長呈增多趨勢，但和生理鹽水組相比差異不顯著(P＞0.05)；模型組CD8+T細胞數(shù)在攻菌后72h極顯著多于生理鹽水組(分別為7.120±1.201和5.920±0.762個/視野，P＜0.01)；模型組TNF-a水平在攻菌后6h達到峰值，和生理鹽水組相比差異極顯著(分別為14.041±0.633和3.624±0.305ng

4、/mL，P＜0.01)；模型組IFN-γ水平在攻菌后6h達到峰值，和生理鹽水組相比差異極顯著(分別為28.490±0.871ng/mL和8.214±0.327ng/mL，P＜0.01)。模型組TNF-a和IFN-γ水平在達到峰值后逐漸下降，在攻菌后48h降至最低點(分別為7.182±0.437和7.686±0.928ng/mL)，在攻菌后72h有所升高。提示在感染早期，脫顆粒肥大細胞數(shù)急劇增多，TNF-a和IFN-γ水平急劇升高可能是促

5、使乳腺急性炎癥的主要原因之一。 治療組乳腺內(nèi)細菌數(shù)在攻菌后24h極顯著低于模型組(分別為7.189±0.232和8.092±0.461lgCFU/g乳腺組織，P＜0.01)，此后治療組細菌數(shù)逐漸下降，乳腺炎癥明顯減輕，全身癥狀逐漸緩解；治療組脫顆粒肥大細胞數(shù)在攻菌后6h比模型組顯著減少(分別為0.600±0.645和0.960±0.735個/視野，P＜0.05)，提示黃芩苷能夠穩(wěn)定肥大細胞膜抑制其脫顆粒減少炎性介質(zhì)的釋放。和模型

6、組相比，治療組CD4+T細胞有所增多，CD8+T細胞顯著減少(P＜0.05)，CD4+/CD8+T細胞比值升高，表明黃芩苷能夠調(diào)節(jié)細胞免疫，提高乳腺免疫力。治療組TNF-a和IFN-γ水平在感染后6h、12h、24h、72h極顯著低于模型組(P＜0.01)，在48h比模型組高，表明黃芩苷能夠調(diào)節(jié)TNF-a和IFN-γ的分泌，使其維持在一定水平，既參與抗菌免疫又防止造成組織過度炎癥。上述結(jié)果表明，黃芩苷能夠抑制金黃色葡萄球菌繁殖降低乳腺感