水曲柳畸形體胚發(fā)生的影響因子研究.pdf

1、水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)是東北地區(qū)珍貴的硬闊樹種，同時(shí)也是我國(guó)東北地區(qū)重要的用材樹種和園林綠化樹種。在水曲柳體細(xì)胞胚誘導(dǎo)培養(yǎng)研究過程中發(fā)現(xiàn)，體細(xì)胞胚發(fā)生率較低，而畸形體胚的發(fā)生率卻較高，這不僅影響體細(xì)胞胚發(fā)生的同步化，同時(shí)也嚴(yán)重的制約體細(xì)胞胚的萌發(fā)、生根以及體胚苗的正常轉(zhuǎn)株，畸形體胚的高頻率發(fā)生成為提高水曲柳體細(xì)胞胚繁殖率和增加其穩(wěn)定性的主要障礙之一。
　　為了研究水曲柳畸形體胚發(fā)生的影響因子

2、及其發(fā)生機(jī)理，本試驗(yàn)通過控制體細(xì)胞胚發(fā)生的外界因子(低溫、蔗糖、瓊脂、硝酸銀、PEG4000、ABA、NAA和6-BA)培養(yǎng)水曲柳未成熟合子胚子葉，利用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)、雙因素交叉設(shè)計(jì)及混合水平均勻設(shè)計(jì)法，研究外界因素對(duì)水曲柳畸形體胚發(fā)生的影響，找出降低水曲柳畸形體胚發(fā)生的最佳培養(yǎng)條件及試圖提高水曲柳正常體細(xì)胞胚的發(fā)生率。其主要結(jié)論如下：
　　低溫預(yù)處理時(shí)間和分化培養(yǎng)基蔗糖濃度顯著影響水曲柳體細(xì)胞胚胎發(fā)生數(shù)、子葉胚發(fā)生數(shù)及畸形胚發(fā)生

3、數(shù)，而分化培養(yǎng)基硬度、PEG4000濃度、銀離子濃度、ABA濃度、6-BA濃度及NAA濃度對(duì)以上指標(biāo)影響不大。其中對(duì)外植體低溫預(yù)處理20 d有利于正常胚發(fā)生率的提高。
　　調(diào)控分化培養(yǎng)基的蔗糖濃度、瓊脂濃度、銀離子濃度、PEG4000濃度、ABA濃度、NAA濃度和6-BA濃度不能明顯降低水曲柳畸形胚的發(fā)生數(shù)和發(fā)生率，畸形體胚的發(fā)生可能與水曲柳的遺傳背景有關(guān)。
　　不經(jīng)過低溫預(yù)處理，經(jīng)前期誘導(dǎo)培養(yǎng)2周后，轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基，分化培