TGF-β1-Smad6信號(hào)通路在哮喘大鼠氣道重塑中的作用及調(diào)控.pdf

1、目的： 1.研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1)、Smad6在支氣管哮喘(簡(jiǎn)稱(chēng)哮喘)氣道重塑中的作用。 2.探討應(yīng)用布地奈德(budesonide,BUD)、地塞米松(dexamethasone,DXM)和福莫特羅對(duì)氣道重塑的調(diào)控及TGF-B1和Smad6表達(dá)的影響。 方法：SPF(specificpathogenfree)級(jí)健康雄性SD(Sprague-

2、Dawlay)大鼠140只，4～6周，120～160克，用卵白蛋白(ovalbumin，OVA)致敏與激發(fā)，建立哮喘大鼠氣道重塑模型。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為對(duì)照組、哮喘組、藥物干預(yù)組(其中藥物干預(yù)組又分為布地奈德干預(yù)組、地塞米松干預(yù)組、福莫特羅干預(yù)組)。具體分組：對(duì)照組根據(jù)激發(fā)時(shí)間分為2周組、4周組、8周組(分別為：A2w、A4w、A8w)，哮喘組根據(jù)激發(fā)時(shí)間分為2周組、4周組、8周組(分別為：B2w、B4w、B8w)，布地奈德干預(yù)組根據(jù)激發(fā)時(shí)間

3、分為2周組、4周組、8周組(分別為：C2w、C4w、C8w)，地塞米松干預(yù)組根據(jù)激發(fā)時(shí)間分為2周組、4周組、8周組(分別為：D2w、D4w、D8w)，福莫特羅干預(yù)組根據(jù)激發(fā)時(shí)間分為2周組、4周組(分別為：E2w、E4w)，每小組10只，共分14小組。各組分別在末次激發(fā)后1～2h處死，留取標(biāo)本備測(cè)。光鏡、電鏡觀察肺組織病理及超微結(jié)構(gòu)變化：BALF沉渣涂片作細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)：圖像分析技術(shù)測(cè)定肺內(nèi)支氣管壁厚度(airwaywallthicknes

4、s，wat)及支氣管平滑肌厚度(airwaysmoothmusclethickness，Wam)等重塑指標(biāo)；ELISA法測(cè)定血清及支氣管肺泡灌洗液(bron-cboalveolarlawagefluid，BALF)中TGF-β1的含量；免疫組化法(immuno-histochemistry，IHC)檢測(cè)肺組織TGF-β1及Smad6蛋白表達(dá)；逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)法(reversetranscription-polymerasechainr

5、eaction，RT-PCR)測(cè)定肺組織勻漿TGF-β1及Smad6的mRNA表達(dá)。 結(jié)論： 1.TGF-β1在哮喘大鼠氣道重塑中表達(dá)增高，Smad6表達(dá)減低，TGF-β1和Smad6表達(dá)的失衡可能促進(jìn)了哮喘氣道重塑的發(fā)生和發(fā)展； 2.糖皮質(zhì)激素可減輕哮喘大鼠氣道炎癥，改善其氣道重塑，可能通過(guò)抑制TGF-β1表達(dá)，促進(jìn)Smad6表達(dá)，調(diào)控TGF-β1/Smad6信號(hào)通路而起作用； 3.福莫特羅可改善哮喘大