葉酸高分子復(fù)合物靶向抗腫瘤藥效及機理的探討.pdf

1、該研究的主要目的在于結(jié)合體內(nèi)外抗腫瘤活性試驗,從組織、細(xì)胞和分子水平探討并初步確立葉酸-右旋糖酐復(fù)合物類藥物靶向抗腫瘤機理,為葉酸-右旋糖酐復(fù)合物作為抗腫瘤藥物的后續(xù)研究提供理論依據(jù).該研究的主要內(nèi)容包括:常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基和實驗動物飼料中葉酸含量的調(diào)整;葉酸高分子復(fù)合物抗腫瘤譜的篩選;葉酸-右旋糖酐復(fù)合物抗腫瘤活性初步研究;葉酸-右旋糖酐復(fù)合物靶向抗腫瘤機理的初步探討;其它葉酸高分子復(fù)合物作為介導(dǎo)葉酸受體靶向腫瘤細(xì)胞藥物或藥物載體的可能性

2、探討;防御素對腫瘤細(xì)胞作用的初步探討.集落形成法考察不同濃度葉酸培養(yǎng)液對腫瘤細(xì)胞生長的影響結(jié)果表明,在一定濃度范圍內(nèi),Hela229細(xì)胞集落形成率隨葉酸濃度的增加而急劇增加,當(dāng)葉酸濃度達(dá)到453.1nmol/L時逐漸趨于飽和.葉酸高分子復(fù)合物抗腫瘤譜的篩選結(jié)果表明,鼻咽癌(KB)、子宮頸癌(HeLa,HeLa229)、肝癌(SMMC7721,Bel7402)、胃癌(SGC-7901)和肺癌(SPC-A-1)等腫瘤細(xì)胞表面葉酸結(jié)合位點均高

3、于60fmol/10<'6>cells.SGC-7901裸鼠腫瘤組織冷凍切片、KB裸鼠腫瘤組織膜蛋白提取液與<'125>I-葉酸均有較高的特異性結(jié)合量,提示葉酸受體在多數(shù)腫瘤細(xì)胞和腫瘤組織中均有較高的表達(dá),因而以葉酸為靶向頭基的葉酸復(fù)合物對體內(nèi)外腫瘤細(xì)胞均能尋找到特異性的靶標(biāo).體內(nèi)外抗腫瘤活性試驗和安全性試驗結(jié)果表明,葉酸-右旋糖酐復(fù)合物能殺傷體內(nèi)外腫瘤細(xì)胞、抑制腫瘤組織生長,同時未見對正常組織的明顯損傷,也未引起動物明顯的過敏反應(yīng),故

4、有可能開發(fā)成一種低毒安全的抗癌藥物.該研究中的葉酸高分子復(fù)合物也對過度表達(dá)葉酸受體的腫瘤細(xì)胞有特異性親和力.羧甲基化右旋糖酐復(fù)合物在小鼠體內(nèi)組織分布、葉酸-羧甲基化右旋糖酐復(fù)合物在荷瘤裸鼠體內(nèi)組織分布和競爭抑制<'125>I-葉酸與腫瘤細(xì)胞結(jié)合等試驗結(jié)果表明,右旋糖酐經(jīng)羧甲基化后,其被肝臟所攝取的量顯著降低,對葉酸受體表達(dá)豐富的體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞HeLa229和KB細(xì)胞也具有特異和親和作用,并對體內(nèi)腫瘤顯現(xiàn)出良好的靶向性.葉酸-聚乙二醇復(fù)