抗生素致咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后氣道反應(yīng)的影響.pdf

1、第一部分抗生素致咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后氣道炎癥及氣道高反應(yīng)的影響
　　 目的：探討咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后氣道炎癥及氣道高反應(yīng)的影響。
　　 方法：將3周齡雌性BALB/c分為4組，分別為:空白對(duì)照組，抗生素組，RSV感染組及RSV感染+抗生素組。在感染后第4天，隨機(jī)抽取小鼠將其肺勻漿進(jìn)行培養(yǎng)及PCR檢測(cè)，對(duì)RSV感染進(jìn)行驗(yàn)證。在感染后第8天，取所有小鼠的咽拭子進(jìn)行培養(yǎng)并PCR測(cè)序驗(yàn)證。感染后第8天及第15天對(duì)各組

2、小鼠進(jìn)行肺泡灌洗液(BALF)炎癥細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、病理切片H&E染色及氣道高反應(yīng)(AHR)檢測(cè)。
　　 結(jié)果：肺勻漿培養(yǎng)結(jié)果及PCR測(cè)序結(jié)果證明RSV成功感染小鼠。PCR及測(cè)序結(jié)果證明抗生素的使用造成了小鼠咽部菌群失調(diào)，而單獨(dú)RSV感染不能影響氣道菌群。RSV感染后第8天，BALF中炎癥細(xì)胞明顯增多，肺部病理?yè)p傷加重，無(wú)AHR。在感染后第15天，BALF中炎癥細(xì)胞較感染后第8天減少，肺部病理?yè)p傷減輕，無(wú)AHR。RSV感染十抗生素組

3、與RSV感染組相比，未在感染后第8天產(chǎn)生任何差異，但在感染后第15天激發(fā)出AHR。在此兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，上述檢測(cè)在抗生素組和空白對(duì)照組之間未見(jiàn)差異。
　　 結(jié)論：RSV感染后急性期肺部炎癥加重，在此基礎(chǔ)上抗生素致咽部菌群失調(diào)可以在后期造成AHR?？股刂卵什烤菏д{(diào)會(huì)激發(fā)RSV感染后AHR。
　　 第二部分抗生素致咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后肺部Treg細(xì)胞的影響
　　 目的：探討抗生素致咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后肺部T

4、reg細(xì)胞的影響。
　　 方法：將3周齡雌性BALB/c分為4組，分別為:空白對(duì)照組，抗生素組，RSV感染組及RSV感染十抗生素組。感染后第8天及第15天利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)各組小鼠肺部Treg細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。感染后第15天分別利用RT-PCR及ELISA對(duì)肺部Foxp3 mRNA的表達(dá)和BALF中IL-10及TGF-β的水平進(jìn)行檢測(cè)。
　　 結(jié)果：RSV感染后第8天及第15天，肺部Treg細(xì)胞比例上調(diào)。而在RSV感染后第15

5、天，抗生素致咽部菌群失調(diào)抑制了肺部Treg細(xì)胞的增殖。僅單獨(dú)使用抗生素也會(huì)降低肺部Treg細(xì)胞的比例。在RSV感染后第15天，肺部Foxp3mRNA的表達(dá)上升;而咽部菌群失調(diào)抑制RSV感染后肺部Foxp3mRNA的表達(dá)。感染后第15天，RSV感染組BALF中IL-10的水平上升，而RSV感染+抗生素組BALF中的IL-10水平上升更明顯。各組BALF中TGF-β的水平未見(jiàn)明顯差異。
　　 結(jié)論：RSV感染誘導(dǎo)肺部Treg細(xì)胞的增

6、殖，而抗生素致咽部菌群失調(diào)會(huì)抑制RSV感染后肺部Treg細(xì)胞的增殖。
　　 第三部分抗生素致咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后肺部CD11c+細(xì)胞的影響
　　 目的：探討抗生素致咽部菌群失調(diào)對(duì)RSV感染后肺部CD11c+細(xì)胞的影響。
　　 方法：將3周齡雌性BALB/c分為3組，分別為:空白對(duì)照組，RSV感染組及RSV感染十抗生素組。感染后第8天利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)各組小鼠肺部CD11c+細(xì)胞的MHC-Ⅱ、CD80、CD86