亞甲基四氫葉酸還原酶和胸苷酸合成酶基因多態(tài)性的檢測(cè)及其意義研究.pdf

1、目的:了解潮汕地區(qū)健康漢族人群亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)677C>T和1298A>C和胸苷酸合成酶(TS)5’-非翻譯區(qū)(UTR)28bp重復(fù)序列3R/2R和3’-UTR6bp缺失或插入(6bp-/6bp+)單核苷酸多態(tài)性(SNPs)分布情況。
　　對(duì)象和方法:研究對(duì)象為100例健康潮汕地區(qū)漢族人群(男64例,女36例),四個(gè)位點(diǎn)突變基因采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RELP)方法檢測(cè)

2、。將獲得的結(jié)果與國(guó)內(nèi)不同地區(qū)漢族和少數(shù)民族的資料比較,分析其在地域和民族分布特點(diǎn)。
　　結(jié)果:潮汕地區(qū)漢族人群MTHFR677CC、CT、TT基因型和677T等位基因頻率分別為65.0％、30.0%、5.0%和20.0%。1298AA、AC、CC基因型和1298C等位基因頻率分別為45.0%、50.0%、5.0%和30.0%。各基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡。利用EH軟件構(gòu)建677C-1298A、677C-12

3、98C和677T-1298A三種單倍體型,頻率分別為50.0%、30.0%和20.0%。兩位點(diǎn)間存在強(qiáng)連鎖不平衡(LD),︱D'︱=1.0。677T等位基因突變頻率和國(guó)內(nèi)大部分南方漢族和少數(shù)民族接近,但顯著低于北方地區(qū)人群(p<0.05)。1298C突變位點(diǎn)頻率明顯高于北方地區(qū)人群,但低于南方的少數(shù)民族(p<0.05)。TS5’-UTR3R/3R、3R/2R和2R/2R基因型分布頻率為61.0%、36.0%和3.0%,3’-UTR6bp

4、-/6bp-、6bp-/6bp+和6bp+/6bp+基因型頻率分別為47.0%、42.0%和11.0%。各基因型分布也符合Hardy-Weinberg定律。5’-UTR2R和3’-UTR6bp+等位基因突變率分別為21.0%和32.0%。共構(gòu)建四種單倍體型,LD分析提示存在強(qiáng)相關(guān),︱D'︱=0.7。兩位點(diǎn)突變頻率和國(guó)內(nèi)大部分地區(qū)漢族和少數(shù)民族頻率接近。
　　結(jié)論:潮汕地區(qū)漢族MTHFR677T和1298C突變率與文獻(xiàn)報(bào)道的我國(guó)南方

5、大部分地區(qū)漢族人群一致,和北方地區(qū)漢族人群及部分少數(shù)民族分布存在顯著差異性。顯示兩個(gè)位點(diǎn)具有明顯的地域和種族遺傳多態(tài)性。而該地區(qū)TS5’-UTR2R及3’-UTR6bp+突變頻率與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)漢族與少數(shù)民族接近,提示兩位點(diǎn)在中國(guó)人群的突變保持相對(duì)穩(wěn)定。
　　目的:通過(guò)了解與葉酸及 Hcy代謝相關(guān)的亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)677C>T、1298A>C和胸苷酸合成酶(TS)5’-UTR3R/2R、3’-UTR6bp-/6bp

6、+基因多態(tài)性在AS、RA患者和正常對(duì)照人群分布情況,探討上述基因突變位點(diǎn)與AS和RA發(fā)病易感性關(guān)系。
　　對(duì)象和方法:采用以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對(duì)照研究,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RELP)技術(shù)檢測(cè)114例AS患者,100例RA患者和100例正常對(duì)照四種基因多態(tài)性。
　　結(jié)果:MTHFR677C>T和1298A>C在AS和RA患者存在強(qiáng)連鎖不平衡(LD),D值分別為0.9和0.8;TS5

7、’-UTR3R/2R和3’-UTR6bp-/6bp+也存在強(qiáng)LD,D值分別為0.8和0.7。TS3’-UTR6bp-/6bp+基因型、6bp+等位基因和3R-6bp+單體型增加女性AS患者的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),OR值分別為2.6(95%CI1.03~6.58),7.8(95%CI0.93~66.33)和3.0(95%CI1.0~9.0)。但由于納入研究的女性患者僅有10例,統(tǒng)計(jì)效能受到一定限制。本研究未觀察到MTFHR677C>T和1298A>C

8、多態(tài)性位點(diǎn)對(duì)AS發(fā)病的影響。在RA組,攜帶MTHFR677CT基因型者發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是CC基因型個(gè)體的2.69(95%CI1.48~4.89)倍。RA組677T等位基因突變頻率明顯高于對(duì)照組[33.5% vs.20.0%,OR=2.02(95%CI1.28~3.17)]。經(jīng)性別調(diào)整后分析,這種趨勢(shì)依然存在。在1298A>C位點(diǎn),對(duì)照組AC、CC基因型和C等位基因突變頻率均高于RA組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩位點(diǎn)的單體型分析提示677T-1298

9、A與RA發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān),與677C-1298A單體型比較,OR=1.83(95%CI1.12~2.97)。TS基因多態(tài)性與降低RA發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān),攜帶3R/2R基因型者發(fā)生RA的風(fēng)險(xiǎn)是3R/3R基因型者的0.50(95%CI0.26~0.93)倍。單體型分析結(jié)果提示2R-6bp+單倍體型可能是RA發(fā)病的一種保護(hù)因素,與攜帶3R-6bp-單體型個(gè)體比較,OR值為0.55,(95%CI0.31~0.99)。另外,本研究未能證實(shí)單獨(dú)TS3’-

10、UTR6bp-/6bp+位點(diǎn)與RA發(fā)病之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)論:MTHFR和TS基因多態(tài)性與RA發(fā)病存在關(guān)聯(lián),其變異可能是決定RA遺傳易感的因素。
　　目的:了解MTHFR677C>T,1298A>C和TS5’-UTR3R/2R,3’-UTR6bp-/6bp+基因多態(tài)性與甲氨蝶呤(MTX)治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、強(qiáng)直性脊柱炎(AS)療效和毒副作用的關(guān)系。
　　對(duì)象和方法:共有58例RA和62例AS納入療效評(píng)

11、價(jià)。85例RA和98例AS患者納入毒副作用評(píng)價(jià)。RA療效評(píng)價(jià)采用DAS28和修改的ACR20,AS療效評(píng)價(jià)采用ASAS20、50、70。詳細(xì)記錄患者服藥過(guò)程發(fā)生的毒副作用,副作用評(píng)價(jià)參照國(guó)家藥物不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)中心對(duì)藥物不良反應(yīng)(adverse drug reaction,ADR)關(guān)聯(lián)性評(píng)價(jià)進(jìn)行篩選。
　　結(jié)果:58例RA患者按DAS28(ESR)療效判定,療效好43例,療效差15例;按DAS28(CRP)評(píng)定,療效好40例,療效差1

12、8例;以ACR20進(jìn)行療效評(píng)分,達(dá)到ACR20標(biāo)準(zhǔn)38例,未達(dá)該標(biāo)準(zhǔn)20例。未發(fā)現(xiàn)與RA療效關(guān)聯(lián)的基因多態(tài)性。62例AS患者,療效評(píng)價(jià)達(dá)ASAS70、ASAS50和ASAS20例數(shù)分別為12、17和22。治療未達(dá)ASAS20共11例?；蚨鄳B(tài)性在不同療效組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。183例接受小劑量MTX治療的RA和AS患者,其中67例發(fā)生藥物相關(guān)副作用(36.6%),未證實(shí)四個(gè)突變位點(diǎn)與毒副作用發(fā)生相關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)論:我們初步的研