乙醛引起的與細(xì)胞內(nèi)鈣循環(huán)紊亂密切相關(guān)的心臟毒性作用分子、細(xì)胞機(jī)制的研究.pdf

1、酒精性心肌癥(Alcoholic cardiomyopathy，ACM)是一種由于長(zhǎng)期大量飲酒所引起的非常嚴(yán)重的擴(kuò)大性的非缺血性心臟損傷，嚴(yán)重的威脅到了人們的生命安全。但是到目前其確切的發(fā)病機(jī)理尚不清楚。近年來(lái)研究所提供的實(shí)驗(yàn)證據(jù)提示我們，乙醛(Acetaldehyde，ACA)作為酒精在體內(nèi)的第一個(gè)氧化代謝產(chǎn)物在酒精性心肌癥的發(fā)病過(guò)程中可能起到了重要的作用。我們的實(shí)驗(yàn)從在體、離體和細(xì)胞水平觀察了乙醛對(duì)大鼠心臟的毒性作用，進(jìn)而為研究乙醛

2、在酒精性心肌癥發(fā)病過(guò)程中所起到的作用提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。我們的實(shí)驗(yàn)觀測(cè)了乙醛對(duì)大鼠心電圖，以及對(duì)在體和離體的心肌力學(xué)指標(biāo)的影響作用。此外，我們還應(yīng)用了膜片鉗和離子成像技術(shù)觀察了乙醛對(duì)心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+離子濃度和細(xì)胞膜L型Ca2+離子通道電流的作用。再有，我們還運(yùn)用了RT-PCR和Western-Bloting等分子生物學(xué)技術(shù)觀察了乙醛引起的幾種主要的心肌細(xì)胞鈣調(diào)控蛋白表達(dá)量的改變。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，乙醛120mg/kg腹腔注射能夠明顯的改

3、變大鼠的心肌力學(xué)指標(biāo)和心電圖指標(biāo)。左心室舒張末期壓由正常的0.088±0.0472kPa被升高到0.479±0.216kPa，同時(shí)心電圖的ST段也由正常對(duì)照組的0.020±0.005mV升高到0.077±0.025mV。30mM乙醛能夠顯著的抑制離體的心臟收縮功能，同時(shí)它又能夠明顯的升高心室肌細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度。我們通過(guò)使用阻斷劑發(fā)現(xiàn)，乙醛使細(xì)胞內(nèi)鈣濃度升高的作用與PKA和PKC介導(dǎo)的信號(hào)通路有關(guān)。此外，乙醛還能有效的抑制心肌細(xì)胞膜L-

4、廣型Ca2+離子通道電流。再有，我們通過(guò)RT-PCR和Westem-Bloting實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)乙醛能夠改變幾種關(guān)鍵的鈣調(diào)控蛋白的表達(dá)量，例如乙醛能夠增加Na+/Ca2+交換蛋白(NCX)和L-型鈣通道蛋白(CaV1.2)的表達(dá)，同時(shí)又能夠抑制肌漿網(wǎng)鈣泵蛋白SERCA2α亞基的表達(dá)。我們的實(shí)驗(yàn)首次系統(tǒng)全面的評(píng)價(jià)了乙醛對(duì)大鼠心臟的毒性作用。在體和離體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示我們，乙醛對(duì)心臟有很強(qiáng)的直接毒性作用，并且這種毒性作用呈現(xiàn)一種負(fù)性肌力效應(yīng)。此外，