水孔蛋白-1在人腹膜組織中的表達及與腹膜透析的關系.pdf

1、研究目的 水孔蛋白(Aquaporins，AQPs)是一組對水高度選擇性的細胞膜轉運蛋白，在維持機體水平衡中起重要作用。迄今已發(fā)現(xiàn)14個同源異構體，水孔蛋白-1(Aquaporin-1，AQPl)是最早被發(fā)現(xiàn)的該家族成員。研究證實腹透時滲透梯度作用下水的轉運主要通過AQP1進行，AQP1被認為是腹膜跨細胞的水轉運通道。本實驗通過觀察AQP1在人腹膜組織的表達，研究其與腹透超濾量及尿量的關系，進一步證實AQP1在腹膜透析的選擇及轉

2、歸中的臨床意義。 方法： 1．于尿毒癥患者行首次腹膜透析置管術時及維持性腹膜透析患者拔管或再次置管時取腹膜活檢標本，另取非尿毒癥腹部手術患者的腹膜標本作為正常對照，排除任何可能累及腹膜的疾病。 2．采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白．過氧化物酶連結法(Streptavidin-Perosidase，SP)及半定量評分系統(tǒng)檢測尿毒癥患者及非尿毒癥患者腹膜AQPl蛋白的表達。 3．采用逆轉錄聚合酶鏈反應(Reve

3、rsed Transcript Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)方法分析尿毒癥患者及非尿毒癥患者腹膜AQPlmRNA的表達。 4．收集患者臨床資料，追蹤調查尿毒癥患者腹膜透析后的超濾量、尿量情況。 5．分析比較非尿毒癥者與尿毒癥患者AQP1的表達，分析AQP1與透析患者的營養(yǎng)狀況、炎癥反應、內生肌酐清除率、腹透超濾量及尿量的關系。 結果： 1．免疫組化結果顯示：毛細血管和

4、小靜脈內皮細胞染色陽性，而小動脈內皮細胞無染色，間皮細胞染色也呈陽性。在所有活檢標本中內皮細胞AQP1表達較間皮細胞明顯增多，兩者比較有顯著差異(t=7.491，p=0.000)。 2．正常對照組與尿毒癥組AQP1的表達正常對照組與尿毒癥患者組．AQPl的表達差別無統(tǒng)計學意義。 3．殘余腎功能對AQP1表達的影響以尿毒癥患者腹膜透析置管術前最后一次化驗血肌酐水平計算肌酐清除率(Creatinine clearance r

5、ate，Ccr)，Ccr>10ml/min者與Ccr≤10ml/min者AQP1表達差別無統(tǒng)計學意義。 4．營養(yǎng)狀況對AQP1表達的影響以尿毒癥患者腹膜透析置術前最后一次化驗血白蛋白水平作為評價營養(yǎng)狀況的指標，AQP1的表達與血白蛋白水平無明顯相關，每袋超濾量和每日超濾量與血白蛋白水平無明顯相關。 5．炎癥反應對AQP1表達的影響以尿毒癥患者血C反應蛋白(CRP)水平作為評價指標，AQPl的表達與血CRP水平無明顯相關，

6、每袋超濾量和每日超濾量與血CRP水平無明顯相關。 6．AQP1的表達和腹膜轉運的相關性所有患者每3月進行一次隨訪，選取患者腹膜透析植管術后3個月第一次隨訪時的超濾量及尿量進行分析。 分析AQP1表達量與每袋超濾量之間的關系(均選取使用1.5％腹透液保留時間4小時透析的患者計算每袋超濾量)，AQP1表達量與每袋超濾量之間無明顯相關。 AQP1表達量與每日超濾量之間無明顯相關。 AQP1表達量與每日尿量之間無