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文檔簡介
1、目的:膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤,常造成神經(jīng)系統(tǒng)的功能障礙,對軀體和認知可引起復(fù)雜的損害,輕者給患者帶來痛苦或殘疾,嚴重時甚至威脅患者的生命。目前臨床上對腫瘤患者一般都采取手術(shù)或者放化療,但由于至今未找到腦膠質(zhì)瘤發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié),所以這些治療方案都不盡如意,膠質(zhì)瘤的治愈率很低,存活期很短。近年來隨著對神經(jīng)干細胞不斷的深入研究,提出了腫瘤干細胞的概念。腦腫瘤干細胞理論認為是存在于腫瘤組織中的一小部分具有干細胞性質(zhì)的細胞群體,它們
2、具有自我更新能力和多向分化潛能,是形成不同分化程度腫瘤細胞和促進腫瘤不斷生長的根源。
2003年Singh等應(yīng)用無血清培養(yǎng)基從膠質(zhì)瘤中分離出具有神經(jīng)干細胞性質(zhì)的CD133和巢蛋白(Nestin)陽性細胞——腦腫瘤干細胞(braintumor stem cell,BTSC),這類細胞具有明顯的自我更新、增殖和分化能力,在體外培養(yǎng)時可分化形成腫瘤細胞,與從腫瘤患者中分離的腫瘤細胞表型相似。目前腦腫瘤干細胞理論認為腫瘤的異質(zhì)性決
3、定腫瘤內(nèi)存在有少量具有干細胞屬性的腫瘤細胞,通過對稱性分裂形成子代干細胞,不對稱性分裂形成子代干細胞和腫瘤前體細胞,隨著干細胞池的逐漸擴大而形成腦腫瘤,并表達腦腫瘤干細胞特征性標志物CD133和巢蛋白,因此理論上神經(jīng)上皮腫瘤中CD133和巢蛋白的陽性細胞率代表著腦腫瘤干細胞在異質(zhì)性腫瘤組織內(nèi)部的含量。目前認為,CD133和巢蛋白等是特異性的腦腫瘤干細胞標志物。
Calabrese等使用免疫熒光共染和多光子激光掃描顯微鏡法,
4、發(fā)現(xiàn)人腦腫瘤組織切片中的腦腫瘤干細胞緊貼腫瘤毛細血管,比普通腫瘤細胞距離毛細血管近得多;在三維基質(zhì)膠培養(yǎng)基中,腦腫瘤干細胞向內(nèi)皮細胞形成的血管遷移,沿血管全長分布并密切接觸,而普通腫瘤細胞與血管結(jié)構(gòu)分離呈圓形散在分布。腦腫瘤中腦腫瘤干細胞的數(shù)量與平均微血管密度(micro vessels density,MVD)相關(guān),以少突膠質(zhì)細胞瘤和膠質(zhì)母細胞瘤的MVD最高,其腦腫瘤干細胞數(shù)量也最多。
本研究采用免疫組化化學(xué)方法檢測星形
5、細胞腫瘤組織中CD133和巢蛋白的陽性表達情況,旨在探討它們與腫瘤分級及腫瘤微血管分布之間的關(guān)系及其意義。
方法:
1:應(yīng)用免疫組化SP法檢測62例人腦膠質(zhì)瘤、6例正常腦組織中CD133和巢蛋白的表達,并分析CD133和巢蛋白的表達與膠質(zhì)瘤病理級別的關(guān)系,及與CD34標記的微血管密度的關(guān)系,探討它們與腫瘤分級及腫瘤微血管分布之間的關(guān)系及其意義。
2:統(tǒng)計學(xué)分析:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,各項
6、參數(shù)值之間的比較采用X2檢驗,Spearman相關(guān)分析進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
1:CD133陽性細胞的總陽性表達率為66.1%。X2=245.35,各組間差異有顯著性P<0.05;各組間兩兩比較,膠質(zhì)瘤各組與正常腦組織間差異均有顯著性(P<0.05)。
2:巢蛋白陽性細胞的總陽性表達率為77.4%。X2=30.81,各組間差異有顯著性P<0.05;各組間兩兩比較,膠
7、質(zhì)瘤各組與正常腦組織間差異均有顯著性(P<0.05)。
3:CD133陽性細胞41例(66.1%),巢蛋白陽性細胞48(77.4%)。CD133陽性細胞組巢蛋白陽性率(95.1%)高于其陰性組(47.6%),X2=4.083 P<0.05統(tǒng)計學(xué)有顯著差異。其中CD133陽性細胞組中巢蛋白陽性細胞39例,CD133陰性細胞組巢蛋白陰性細胞11例,兩者表達密切相關(guān)(rs=0.998 P<0.05)。
4:CD13
8、3、巢蛋白均陽性染色組(39例,52.5±20.0)的CD34-MVD值高于兩者均陰性組(11例,MVD=26.6±13.7),兩樣本t檢驗,t=7.553 P<0.01兩者具有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)論:
(1)腦膠質(zhì)瘤中的Nestin和CD133的陽性細胞率能夠代表著膠質(zhì)瘤干細胞在異質(zhì)性腫瘤組織內(nèi)部的含量;
(2)人類的腦膠質(zhì)瘤中CD133及Nestin的表達和腫瘤的惡性程度呈正相關(guān);
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