CD133和巢蛋白陽(yáng)性細(xì)胞在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及分布特征.pdf

1、目的:膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤,常造成神經(jīng)系統(tǒng)的功能障礙,對(duì)軀體和認(rèn)知可引起復(fù)雜的損害,輕者給患者帶來(lái)痛苦或殘疾,嚴(yán)重時(shí)甚至威脅患者的生命。目前臨床上對(duì)腫瘤患者一般都采取手術(shù)或者放化療,但由于至今未找到腦膠質(zhì)瘤發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié),所以這些治療方案都不盡如意,膠質(zhì)瘤的治愈率很低,存活期很短。近年來(lái)隨著對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞不斷的深入研究,提出了腫瘤干細(xì)胞的概念。腦腫瘤干細(xì)胞理論認(rèn)為是存在于腫瘤組織中的一小部分具有干細(xì)胞性質(zhì)的細(xì)胞群體,它們

2、具有自我更新能力和多向分化潛能,是形成不同分化程度腫瘤細(xì)胞和促進(jìn)腫瘤不斷生長(zhǎng)的根源。
　　 2003年Singh等應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)基從膠質(zhì)瘤中分離出具有神經(jīng)干細(xì)胞性質(zhì)的CD133和巢蛋白(Nestin)陽(yáng)性細(xì)胞——腦腫瘤干細(xì)胞(braintumor stem cell,BTSC),這類細(xì)胞具有明顯的自我更新、增殖和分化能力,在體外培養(yǎng)時(shí)可分化形成腫瘤細(xì)胞,與從腫瘤患者中分離的腫瘤細(xì)胞表型相似。目前腦腫瘤干細(xì)胞理論認(rèn)為腫瘤的異質(zhì)性決

3、定腫瘤內(nèi)存在有少量具有干細(xì)胞屬性的腫瘤細(xì)胞,通過對(duì)稱性分裂形成子代干細(xì)胞,不對(duì)稱性分裂形成子代干細(xì)胞和腫瘤前體細(xì)胞,隨著干細(xì)胞池的逐漸擴(kuò)大而形成腦腫瘤,并表達(dá)腦腫瘤干細(xì)胞特征性標(biāo)志物CD133和巢蛋白,因此理論上神經(jīng)上皮腫瘤中CD133和巢蛋白的陽(yáng)性細(xì)胞率代表著腦腫瘤干細(xì)胞在異質(zhì)性腫瘤組織內(nèi)部的含量。目前認(rèn)為,CD133和巢蛋白等是特異性的腦腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物。
　　 Calabrese等使用免疫熒光共染和多光子激光掃描顯微鏡法,

4、發(fā)現(xiàn)人腦腫瘤組織切片中的腦腫瘤干細(xì)胞緊貼腫瘤毛細(xì)血管,比普通腫瘤細(xì)胞距離毛細(xì)血管近得多;在三維基質(zhì)膠培養(yǎng)基中,腦腫瘤干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞形成的血管遷移,沿血管全長(zhǎng)分布并密切接觸,而普通腫瘤細(xì)胞與血管結(jié)構(gòu)分離呈圓形散在分布。腦腫瘤中腦腫瘤干細(xì)胞的數(shù)量與平均微血管密度(micro vessels density,MVD)相關(guān),以少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的MVD最高,其腦腫瘤干細(xì)胞數(shù)量也最多。
　　 本研究采用免疫組化化學(xué)方法檢測(cè)星形

5、細(xì)胞腫瘤組織中CD133和巢蛋白的陽(yáng)性表達(dá)情況,旨在探討它們與腫瘤分級(jí)及腫瘤微血管分布之間的關(guān)系及其意義。
　　 方法:
　　 1：應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)62例人腦膠質(zhì)瘤、6例正常腦組織中CD133和巢蛋白的表達(dá),并分析CD133和巢蛋白的表達(dá)與膠質(zhì)瘤病理級(jí)別的關(guān)系,及與CD34標(biāo)記的微血管密度的關(guān)系,探討它們與腫瘤分級(jí)及腫瘤微血管分布之間的關(guān)系及其意義。
　　 2：統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件,各項(xiàng)

6、參數(shù)值之間的比較采用X2檢驗(yàn),Spearman相關(guān)分析進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1：CD133陽(yáng)性細(xì)胞的總陽(yáng)性表達(dá)率為66.1％。X2=245.35,各組間差異有顯著性P＜0.05;各組間兩兩比較,膠質(zhì)瘤各組與正常腦組織間差異均有顯著性(P＜0.05)。
　　 2：巢蛋白陽(yáng)性細(xì)胞的總陽(yáng)性表達(dá)率為77.4％。X2=30.81,各組間差異有顯著性P＜0.05;各組間兩兩比較,膠

7、質(zhì)瘤各組與正常腦組織間差異均有顯著性(P＜0.05)。
　　 3：CD133陽(yáng)性細(xì)胞41例(66.1％),巢蛋白陽(yáng)性細(xì)胞48(77.4％)。CD133陽(yáng)性細(xì)胞組巢蛋白陽(yáng)性率(95.1％)高于其陰性組(47.6％),X2=4.083 P＜0.05統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著差異。其中CD133陽(yáng)性細(xì)胞組中巢蛋白陽(yáng)性細(xì)胞39例,CD133陰性細(xì)胞組巢蛋白陰性細(xì)胞11例,兩者表達(dá)密切相關(guān)(rs=0.998 P＜0.05)。
　　 4：CD13

8、3、巢蛋白均陽(yáng)性染色組(39例,52.5±20.0)的CD34-MVD值高于兩者均陰性組(11例,MVD=26.6±13.7),兩樣本t檢驗(yàn),t=7.553 P＜0.01兩者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:
　　 (1)腦膠質(zhì)瘤中的Nestin和CD133的陽(yáng)性細(xì)胞率能夠代表著膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在異質(zhì)性腫瘤組織內(nèi)部的含量;
　　 (2)人類的腦膠質(zhì)瘤中CD133及Nestin的表達(dá)和腫瘤的惡性程度呈正相關(guān);