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文檔簡介
1、目的:腦膠質瘤發(fā)病率約占顱內(nèi)腫瘤的45%,治療以手術切除為主,輔以放療、化療和免疫治療等其他方法。如何提高術后治療效果,對延長腦膠質瘤患者的生存期,提高生存質量,以期達到根治目的有十分重要的意義。 血管發(fā)生對于腫瘤形成和維持是非常重要的,血管發(fā)生的調(diào)節(jié)是一個復雜的過程,在這個過程中,腫瘤細胞和新血管系統(tǒng)通過自分泌和旁分泌的生長因子相互作用,依賴于血管發(fā)生的惡性膠質瘤是高度致死性的癌癥,治療有效性的提高要求我們進一步了解促進惡性膠
2、質瘤血管發(fā)生的分子機制。對惡性膠質瘤和其它腦癌的最新研究發(fā)現(xiàn)了與普通神經(jīng)干細胞有共同特性的腫瘤亞群,神經(jīng)膠質瘤的關鍵亞群CD133+細胞與神經(jīng)干細胞有相同的特性,其表達神經(jīng)干細胞標志物(包括細胞表面抗原prominin-1/CD133),能夠自我更新,形成神經(jīng)球樣的球體和分化成復雜的神經(jīng)系統(tǒng)家族。由于血管生成在腫瘤形成中是關鍵一步(血管生成開關),我們從人的膠質瘤標本中分離出CD133+膠質瘤細胞(以下簡稱CD133+GC)。研究了CD
3、133+GC是否是通過促進血管發(fā)生進而促使腫瘤形成,證實了CD133+GC與腫瘤增殖和血管生成的關系。 材料和方法:病人標本的收集:病人的活檢標本被,這些病人包括初次就診的和惡性膠質瘤復發(fā)的,病理結果來自于山東省立醫(yī)院病理科。 逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)測定CD133 mRNA在膠質瘤組織中心及邊緣區(qū)域的表達和分布情況,并利用免疫磁珠分選術對腫瘤細胞進行分類,通過細胞分選,我們把CD133+和CD133-的腫瘤
4、細胞群分離開,短時間培養(yǎng)后,我們把細胞植入無胸腺小鼠的右額葉中,然后,我們收集有變化小鼠的大腦,用福爾馬林固定,石蠟包埋,做成切片,進行病理檢查,用CD31標記腫瘤細胞,用Weidner法測量腫瘤的血管密度。 結果和討論: 1.分離、提純和培養(yǎng):中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤干細胞與神經(jīng)干細胞表型相似,這已經(jīng)得到確認,我們對來自患者手術標本的惡性膠質瘤組織進行短期培養(yǎng),標本通過皮下或者顱內(nèi)移植到免疫缺陷的小鼠上。人類的腫瘤標本正好證實
5、了人類癌癥的生物學過程,而人的膠質瘤標本大量提純有活力的腫瘤細胞,我們可以利用干細胞表面標記物CD133來選取富含CD133+細胞群。我們先分解腫瘤,用CD133抗體標記,利用MACS進行分類,然后,我們分別對CD133+和CD133-腫瘤細胞進行短期培養(yǎng)。 2.由CD133+GC分化產(chǎn)生的腫瘤有豐富的血管供應,更易壞死和出血對干細胞樣癌細胞的最新研究表明腫瘤的來源可以分成兩類,分別是CD133+和CD133-細胞。為了研究膠質
6、瘤亞群的致瘤能力,我們將CD133-或CD133+的膠質瘤細胞植入無胸腺裸鼠的右額葉,這些瘤細胞來自惡性膠質瘤病人標本。植入CD133+瘤細胞的大腦產(chǎn)生的腫瘤血管明顯增多和更易出血,這和植入CD133-瘤細胞的大腦形成鮮明對比。對植入CD133+GC的大腦進行病理分析,我們發(fā)現(xiàn)腫瘤巨大,高度增殖,血液供應豐富,多發(fā)的壞死和出血。植入CD133-腫瘤細胞的小鼠全都沒產(chǎn)生腫瘤。把移植CD133+和CD133-細胞的大腦進行CD31染色并對比
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