載脂蛋白基因多態(tài)性與中藥療效的關(guān)系研究.pdf

1、冠心病是嚴(yán)重危害人類健康的重大復(fù)雜性疾病，其病理、預(yù)防和治療是當(dāng)前醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域的研究熱點和難點。氣虛血瘀證是冠心病的常見類型，芪參益氣滴丸是適應(yīng)于治療該類型冠心病的中藥復(fù)方制劑藥物。載脂蛋白基因多態(tài)性與冠心病的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系，但與氣虛血瘀型及其中藥治療效果之間是否存在關(guān)系，目前還未見報道。 本課題選取符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的氣虛血瘀型冠心病患者49人納入研究，門診服用芪參益氣滴丸1月，治療前后各抽取血樣一次，提取外周血白細(xì)胞DNA，PC

2、R擴(kuò)增APOA1基因第1外顯子，APOA4基因第3外顯子和APOE基因第4外顯子。PCR條件如下，預(yù)變性95℃3min，1個循環(huán)；變性95℃60s，退火50s溫度分別為APOA1，65℃，APOA4和APOE，55℃，延伸72℃ 50s，35個循環(huán)：最后72℃ 10min，1個循環(huán)。產(chǎn)物長度分別為767bp、1148bp和478bp。測序后，與數(shù)據(jù)庫比對，檢測其多態(tài)性位點，得到APOA1，APOA4和APOE基因中SNP密度分別為13.

3、33％、0.08％和0.93％。 應(yīng)用SPSS統(tǒng)計分析，探索載脂蛋白基因多態(tài)性位點與冠心病及其治療效果之間的關(guān)系。找到7個有義SNP位點，其中只與冠心病有關(guān)的位點3個，只與治療效果有關(guān)的位點1個，兩者皆有關(guān)的位點2個，兩者皆無關(guān)的位點1個。APOA1基因第276位堿基突變使自汗癥狀加重和BG含量偏高；第295位點突變也使BG含量偏高；第339位點突變使自汗癥狀加重，但同時使得TC和VLDL明顯偏低。APOA4基因第917位堿基突

4、變使自汗癥狀更加嚴(yán)重和BG濃度升高，并且使藥物降低LDL的作用更加明顯。APOE基因第2888位堿基突變使得MDA減少，并且使藥物治療神疲乏力的效果得到加強(qiáng);第2903位堿基突變使得胸痛、自汗的治療效果有顯著影響，并且最終對整個中醫(yī)癥狀的改善有顯著影響，但同時也使BG和apoB都有所增加。 鑒于載脂蛋白基因在冠心病和藥物治療方面的重要性，本課題在基因水平，探索單核苷酸多態(tài)性的病理作用與中藥療效之間的關(guān)系，對于中藥新藥的研究與開發(fā)