孟魯司特鈉對哮喘大鼠肺組織、脾臟、胸腺NF-κBmRNA表達的影響及病理變化的研究.pdf

1、目的:通過建立哮喘大鼠模型,以孟魯司特鈉作為干預(yù)因素,比較哮喘大鼠肺臟、脾臟、胸腺淋巴細胞中NF-κB mRNA的變化以及肺組織和脾臟的病理改變,從而為孟魯司特鈉在支氣管哮喘中的防治提供理論根據(jù)。
　　方法:36只大鼠隨機分成正常對照組(A組)、哮喘組(B組)及孟魯司特鈉組(C組),每組12只大鼠。實驗第1、7天A組兩次行生理鹽水溶解的氫氧化鋁腹腔致敏,第14天起以生理鹽水連續(xù)霧化14天,60分鐘/次/日。B組及C組行OVA混懸液

2、腹腔注射致敏1.0ml/只/次(0.08％OVA和氫氧化鋁混合液),第14天起霧化吸入1%OVA溶液進行激發(fā),每日一次,每次60分鐘,持續(xù)霧化一周,建立哮喘模型,模型建立成功后繼續(xù)霧化7天。于霧化激發(fā)后第8天,哮喘組(B組)于OVA霧化前一天始,每次OVA霧化前給予生理鹽水(NS)灌胃;孟魯司特鈉組(C組)自O(shè)VA霧化激發(fā)前一天始,每次OVA霧化前給予孟魯司特0.2 mL(6mg/kg,NS溶解)灌胃,干預(yù)共一周。霧化激發(fā)14天后取材,

3、快速分離肺臟、脾臟、胸腺冰凍切片后按NF-κB P50 mRNA原位雜交試劑盒說明書進行雜交染色,復(fù)染后顯微鏡觀察 NF-κB mRNA陽性表達的細胞(細胞胞漿著色呈棕黃色)比例,取肺組織和脾臟進行病理觀測。
　　結(jié)果:(1)肺、胸腺、脾臟淋巴細胞中NF-κB mRNA表達的變化結(jié)果:霧化激發(fā)14天后哮喘組大鼠肺組織、胸腺組織、脾臟淋巴細胞中NF-κB活化增強,NF-κB陽性表達的細胞高于正常對照組(P<0.05)。孟魯司特鈉組大

4、鼠肺組織、胸腺組織、脾臟淋巴細胞中NF-κB活化減弱,NF-κB陽性表達的細胞減少,與哮喘組比較有顯著差異(P<0.05)。(2)肺組織及脾臟的病理改變:正常對照組:支氣管肺組織結(jié)構(gòu)正常,各級支氣管上皮完整,肺泡間隔正常,炎性細胞浸潤較少。脾臟紅髓白髓結(jié)構(gòu)正常,白髓淋巴區(qū)增生不明顯。哮喘組:肺內(nèi)氣道上皮內(nèi)杯狀細胞增多,粘膜下層淋巴細胞浸潤增多,周圍間質(zhì)中淋巴細胞和嗜酸性粒細胞中重度浸潤,肺泡隔明顯增寬,肺泡腔有紅細胞、淋巴細胞滲出。脾臟

5、紅髓區(qū)淋巴細胞稀疏,白髓擴大,白髓淋巴細胞區(qū)中度增生。孟魯司特鈉組:肺內(nèi)氣道上皮內(nèi)杯狀細胞增生減少,粘膜下層淋巴細胞浸潤較少,周圍間質(zhì)中淋巴細胞和嗜酸性粒細胞輕中度浸潤,肺泡隔增寬不明顯,肺泡腔有紅細胞、淋巴細胞滲出。脾臟紅髓區(qū)淋巴細胞稀疏,白髓輕度擴大,白髓淋巴細胞區(qū)輕中度增生。
　　結(jié)論:(1)孟魯司特鈉抑制哮喘大鼠肺組織、胸腺組織、脾臟淋巴細胞中NF-κB的活化,NF-κB陽性表達的細胞減少,在支氣管哮喘的發(fā)病機制中有一定的