紅菜薹游離小孢子培養(yǎng)和植株再生技術研究.pdf

1、本文以12個基因型的紅菜薹品種或品系為試材，采用游離小孢子培養(yǎng)的方法，探討了影響小孢子胚誘導的因素、促進小孢子植株再生的方法，以及小孢子植株的倍性鑒定方法，獲得了下列結果： 1．基因型、花蕾大小對胚狀體誘導的影響 不同基因型材料的胚胎發(fā)生能力有很大差異。在12個供試材料中，有9個材料獲得了胚狀體，占供試材料的75％。其中b和D二個材料胚誘導率較高，b的產胚率達到4.52個／蕾，單皿最高產胚量達到63個。出胚材料中，最低的

2、產胚率僅為0.02個胚／蕾。 紅菜薹花蕾大小與小孢子發(fā)育時期的關系：染色觀察表明，當花蕾長為2.50～3.50mm時，小孢子產胚率較高，達到4.40個／蕾，適合進行游離小孢子培養(yǎng)，此時花瓣與花藥長度之比為3／4～1／1。采用<2.00mm和>4.00mm的蕾培養(yǎng)則沒有得到胚狀體。 2．不同培養(yǎng)條件對胚狀體誘導的影響 4℃低溫預處理花蕾對紅菜薹胚胎發(fā)生有負作用，隨低溫處理時間的延長，產胚量逐漸下降。處理1d產量有所

3、下降，但下降不顯著，每30蕾產胚量比對照69個少了11個。處理2d的每30蕾產胚量下降到21個，差異顯著。采用新鮮的或低溫處理不超過1天的花蕾培養(yǎng)效果較好。 培養(yǎng)基中添加0.5g／L活性炭對不同基因型胚狀體的誘導效率提高程度不同，但均表現促進作用。材料X增加最為顯著，每30個蕾的產胚量由18個提高到34個，增加了88.89％。同時添加活性炭后，出胚時間提前，子葉型胚數明顯增加，心型胚和魚雷胚比例明顯提高。 培養(yǎng)基中添加6

4、-BA對紅菜薹小孢子胚狀體誘導有促進作用，適宜添加濃度為0.2mg／L，過高則起抑制作用，6-BA濃度為0.2mg／L時，材料b的誘導率達到最高值，每30個蕾的胚產量由135提高到174個，為CK的129％，與對照差異極顯著。添加NAA對胚狀體誘導有一定的抑制作用。 3．不同培養(yǎng)基對小孢子植株再生的影響 培養(yǎng)基的水分狀況直接影響小孢子胚的直接分化成苗能力及成苗方式。子葉型胚在15g／L瓊脂的培養(yǎng)基上直接成苗率最高，達56

5、.67％。而瓊脂濃度為9g／L時，胚狀體直接成苗率僅為11.67％，多褐化死亡。 本實驗研究了小孢子植株在培養(yǎng)基MS+NAA（0.2mg／L）、MS+NAA（0.5mg／L）、1／2MS、1／2MS+IBA（0.5mg／L）、1／2MS+IAA（0.2mg／L）上的生根情況。結果表明，再生植株在1／2MS+IBA（0.5mg／L）上生根效果好、在1／2MS上生根效果其次；生根能力同基因型有關，如株系D-1各種培養(yǎng)均能生根、生根率