蘿卜(raphanussativusl.)小孢子培養(yǎng)技術(shù)體系的構(gòu)建及再生植株研究

1、華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文蘿卜（Raphanus sativus L.）小孢子培養(yǎng)技術(shù)體系的構(gòu)建及再生植株研究姓名：熊秋芳申請學位級別：碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)推廣·種植指導教師：吳江生;張雪清20081101華中農(nóng)業(yè)人學專業(yè)學位碩士學位論文 蘿卜小孢子培養(yǎng)技術(shù)體系的構(gòu)建及再生植株研究A B S T R A C TI no r d e rt oe s t a b l i s ha t le f f i c i e n tt e c h n

2、 i q u es y s t e m o fi s o l a t e dm i c r o s p o r ec u l t u r ei nr a d i s h a n da c c e l e r a t e t h es p e e do fa p p l i c a t i o no fi s o l a t e dm i c r o s p o r ec u l t u r ei nb r e e dp r o g r

3、a m ．T w e n t yv a r i e t i e s o f r a d i s h w e r eu s e d f o ri s o l a t e d m i c r o s p o r ec u l t u r e ．T h ef a c t o r st h a t i n f l u e n c em i c r o s p o r ee m b r y o g e n e s i s ，m i c r o s

4、 p o r ep l a n t r e g e n e r a t i o n w e r es t u d i e d i n t h er e s e a r c h ．A t t h e s a m et i m e ，t h e m e t h o d s o ft r a n s p l a n t i n g a n d p l o i d yi d e n t i f i c a t i o nf o rm i c r

5、 o s p o r e —d e r i v e dp l a n t sa n du n i f o r m i t yi d e n t i f i c a t i o no f h o r t i c u l t u r a lc h a r a c t e r sf r o m t h eD H l i n ep r o g e n i e sa n d h y b r i d s d e v e l o p e d w i

6、t h D H l i n e sw e r es t u d i e da sw e l l ．T h e r e s u l t sa l ea sf o l l o w s ：1 ．T h es u i t a b l es a m p l e d b u d w a s o n e o f t h ek e y f a c t o r s a f f e c t i n ge m b r y o i d i n d u c t

7、i o no fr a d i s h ，T h ec y t o l o g i c a lo b s e r v a t i o no f b u d d i f f e r e n tl e n g t hs h o w e dt h a tt h eb u d w i t hl e n g t hr a n g i n gf r o m3 ．0 m mt o4 ．0 m m ，8 0 ％o ft h e p o l l e n

8、a t t h e l a t e u n i n u c l e a t ea n db i n u c l e a t es t a g e ，a r eo p t i m a lf o r i s o l a t e dm i c r o s p o r ec u l t u r e o f r a d i s h ．2 ．T h ee m b r y o g e n e s i sa b i l i t yo fd i f f

9、e r e n tg e n o t y p e s v a r i e sa l o t ，8 g e n o t y p e s a m o n g2 0g e te m b r y o i ds u c c e s s f u l l yi nt h er e s e a r c h ．T h e e m b r y o i di n d u c t i o nr a t e i s 4 0 ％．T h eh i g h e s

10、te m b r y o y i e l dw a s 6 ．0e m b r y o i d p e r b u d f r o m “q i a n x i I I ”．3 ．M e d i u mw i t h l o wc o n c e n t r a t i o nC a np r o m o t e di n d u c t i o n r a t e o f e m b r y o i d ．C o m p a r e

11、d t oN L N 一1 2 m u d i u m ，r e d u c i n gt h ec o n c e t o f m a j o r s a l t so f N L N 一1 2 m e d i u m b yh a l fa n d d o u b l eo r g a n i c n o to n l yi n c r e a s e t h eg e n o t y p e s b u t a l s oC a

12、n r e m a r k a b l y r a i s et h ee m b r y o i d i n d u c t i o n r a t e ．4 ．P r e t r e a m e n t a t 3 2 “ C h i g h —t e m p e r a t u r e a n d a t 4 “ C l o w - t e m p e r a t u r e c o u l dr e m a r k a b l

13、y r a i s et h e e m b r y o i d i n d u c t i o n r a t e ．5 ．P l a n t g r o w t hr e g u l a t o rh a v es o m ee f f e c t s o nr a d i s h e m b r y o i di n d u c t i o n a n dd e v e l o p m e n t ．T h es u i t a

14、b l ec o n t e n t p r o p o r t i o n sa r e6 - B A 0 ．0 5a n d 2 , 4 一D0 ．0 1 ．6 ．T h e o p t i m a l m e d i u mf o r p l a n t l e t r e g e n e r a t i o n c o t y l e d o n s h a p e de m b r y o s i s“B 5 + 2 ％s u

15、 c r o s e + 1 ．O ％a g a r ' ’；“B 5 斗- N A A 0 ．2 m g ．L ．1 + 2 ％s u c r o s e + 1 ．O ％a g a r ' ’W a so p t i m a lc u l t u r em e d i u m f o rr o o t a g e o f r a d i s h ．7 ．T h e r e a s u l t s s h o w e

16、d F C M W a s a f a s t m e n s u r a t i o n ．T h e p l o i d y l e v e l s o fr e g e n e r a t i o np l a n t sw e r ei n d e n t i c a l t ot h a to ft h ep l a n t sg r o w ni nt h ef i e l d ．T h er e s u l t ss h

17、o w e d D H p l a n t so b t a i n e di nt h ee x p e r i m e n t h a v ec o n s p i c u o u s s e l f - i n c o m p a t i b i l i t ya n dl i v eu pt Ot h es t a n d a r do f s e l f - i n c o m p a t i b l el i n e ．K