力學(xué)刺激對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠成骨細胞作用的細胞分子基礎(chǔ).pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文力學(xué)刺激對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠成骨細胞作用的細胞分子基礎(chǔ)姓名：李良申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：陳槐卿20040512力孕剎激對絕經(jīng)后甘質(zhì)從松大民成骨細胞作用的細胞分子基抽—李良confluence)，給細胞施加力學(xué)刺激，頻率為1Hz，力學(xué)刺激分別為40010004000，strain:作用時間分別為每天30min248h，共加載兩天。以未受力學(xué)刺激的細胞為對照組，受力學(xué)刺激的細胞為實驗組，并進行比較。

2、采用流式細胞技術(shù)測定integrin。:，0，，0a在成骨細胞膜上的表達量、細胞周期分布與細胞增殖變化采用同位素標(biāo)記方法檢測成骨細胞骨鈣素、I型前膠原C端前膚(PICP)和總蛋白的分泌量采用鬼筆環(huán)膚染色肌動蛋白(Factin)，在熒光共聚焦顯微鏡下觀察細胞骨架結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果表明:1)3ovx組和6ovx組大鼠切除卵巢3月后，雌激素分泌量降低，骨量減少，骨力學(xué)性能下降，表現(xiàn)出與婦女絕經(jīng)后相似的高骨轉(zhuǎn)換率骨質(zhì)疏松。2)在靜態(tài)培養(yǎng)條件下，從

3、各組大鼠分離的顱頂骨成骨細胞均有integrina200a蛋白水平的表達，其中0:表達量最高。6ovx組成骨細胞integrina20，的表達量明顯降低:其余各組間無明顯差異.3)在靜態(tài)培養(yǎng)條件下，3ovx組和6ovx組大鼠成骨細胞增殖活性明顯增高，這與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松骨代謝的高轉(zhuǎn)換率相一致。4)3control組成骨細胞對力學(xué)刺激YA敏感，較小的力學(xué)應(yīng)變(400“strain)作用就可上調(diào)integrina20，、0。的表達量，促進成骨

4、細胞合成骨基質(zhì)的能力增加，促進成骨細胞的增殖、分化。在1000tstrain力學(xué)刺激下，3control組成骨細胞integrina200:的表達量出現(xiàn)明顯上調(diào)，成骨細胞合成骨基質(zhì)的能力增加也最為明顯。在4000ustrain力學(xué)刺激下，3control組成骨細胞integrina:，0，，0。的表達量進一步增高，對3control組成骨細胞的作用主要是增加成骨細胞的增殖活性，抑制成骨細胞的分化成熟。5)6control組成骨細胞對力學(xué)

5、刺激的敏感性低于3control組成骨細胞。在10001strain力學(xué)刺激下，成骨細胞integrina200，的表達量出現(xiàn)上調(diào):在4000ustrain力學(xué)刺激下，成骨細胞integrina。，0，，0，的表達量明顯上調(diào)，成骨細胞合成骨基質(zhì)的能力與增殖活性增加。但力學(xué)刺激對6control組成骨細胞合成分泌功能和細胞增殖活性的影響明顯于小于對3control組成骨細胞的影響。6)3ovx組和6ovx組在4444ustrain力學(xué)刺激