急性酒精刺激通過調控ROS-JNK-Bcl-2通路活性調節(jié)自噬引起的心肌損傷.pdf

1、實驗目的：
　　無節(jié)制的酗酒會導致心肌自噬上調，并且經常會誘發(fā)心臟損傷。考慮到在各種心肌疾病中，自噬扮演著非常重要的作用，我們當前的研究是為了確定自噬在酒精引起的心肌損傷中的作用及其潛在的機制。
　　實驗方法：
　　我們使用 FVB和金屬硫蛋白（metallothionein，MT）高表達的小鼠以及GFP-LC3轉基因小鼠，3g/kg的酒精劑量腹腔連續(xù)注射三天，造成急性酒精損傷。同時也檢測了酒精對原代心肌細胞和H9c2

2、細胞系的影響。自噬流的水平、心臟凋亡和功能、活性氧積累水平、JNK磷酸化水平以及Beclin1和Bcl-2的結合都進行了檢測。
　　實驗結果：
　　我們的研究證明了不論在體內還是體外，酒精刺激都可以提高LC3-II蛋白表達水平和LC3-II熒光斑點數(shù)量，進而引發(fā)心肌細胞凋亡。此外，我們發(fā)現(xiàn)酒精可以引起自噬和心肌損傷，很大程度上是由于有序地誘發(fā)ROS積聚，JNK活化，Bcl-2磷酸化，導致Beclin1和Bcl-2復合物解離。

3、相反地，通過藥物制劑抑制酒精引起自噬流的增加，也可以明顯減緩小鼠心臟或者細胞中酒精引起的心肌細胞凋亡和心肌組織損傷。使用抗氧化N-acetyl cysteine（NAC）清除ROS或者通過JNK抑制劑SP600125抑制JNK都可以減少酒精引起的自噬以及隨后自噬所調控的凋亡發(fā)生。而且，在MT-TG小鼠中，活性氧和活性氮清除劑MT，同樣可以衰減酒精引起的自噬和細胞凋亡。
　　結論：
　　總而言之，我們的研究表明急性酒精刺激引起