抗金黃色葡萄球菌工程多肽體內外抗菌活性研究.pdf

1、最近二十年來,在基礎微生物領域取得的重大進展之一是發(fā)現(xiàn)細菌細菌間通過分泌和感應特定的信號分子進行細胞間"通訊",以判斷環(huán)境中同類細菌數(shù)量,決定自身的生長、基因的表達以及毒力因子的產(chǎn)生的現(xiàn)象,稱作"數(shù)量閾值感應(Quorum sensing)".其信號因子(信息素)具有自主導向(autoinducing)并特異性識別同種細菌膜上受體的作用,又被稱作"自主誘導因子(autoinducer)".Qiu等選擇金黃色葡萄球菌的八肽信息素agrD1

2、作為大腸菌素Ia的"誘導物",將其連接到大腸菌素Ia的羧基端上,產(chǎn)生融合蛋白Pheromonicin-SA(Ph-SA).該融合蛋白表現(xiàn)出了構成它的兩個前體——金黃色葡萄球菌信息素和大腸菌素Ia各自都不具有的殺傷金黃色葡萄球菌的生物活性.前期研究已證實,Ph-SA對產(chǎn)青霉素霉金黃色葡萄球菌ATCC 29213及耐甲氧西林/本唑西林金黃色葡萄球菌顯示出了極強的殺菌活性,本研究將在此基礎上進一步定量評價Ph-SA對多種細菌尤其是耐甲氧西林/

3、本唑西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的體內外抗菌活性.方法:體外部分采用瓊脂二倍稀釋法檢測Ph-SA對多種革蘭氏陽性菌和陰性菌的最小抑菌濃度(minimal inhibitory concentration,MIC);并重點比較Ph-SA與對照藥物頭孢唑啉、苯唑西林、萬古霉素等對耐甲氧西林/苯唑西林金葡菌(MRSA)的抗菌活性大小(將試驗所得MIC<,50>按分子量差異進行校正).體內部分選用KM小鼠腹腔注射最小致死劑量(1MLD)的金葡

4、菌ATCC BAA-42(為MRSA菌株),建立全身系統(tǒng)感染模型,1小時后經(jīng)尾靜脈注射給予不同劑量的Ph-SA及對照藥物,觀察8天內小鼠存活情況,繪制生存曲線圖,比較不同藥物高低劑量處理小鼠的8天存活率,以評價Ph-SA對MRSA感染小鼠的體內保護作用.綜上所述:Ph-SA對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)具有極強的體內外抗菌活性,按分子量差異換算后得出,其體外抗菌活性是萬古霉素的12倍,體內抗菌活性至少是萬古霉素的59倍.Ph-S